现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性,并比较二者毒性的强弱.请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列实验报告并回答有关问题.Ⅰ.实验原理:有毒物质能诱导细胞产生变异有毒物质能诱导细胞产生变异.
根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性.
Ⅱ.实验材料:活的小白鼠胚胎.
Ⅲ.药品用具:胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片.Ⅳ.实验步骤
(1)制备细胞悬浮液
把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液.
(2)进行细胞培养
①取A、B、C三个洁净的培养瓶,消毒灭菌,加入等量的细胞悬浮液消毒灭菌,加入等量的细胞悬浮液.
②向A培养瓶中加入化学物质甲,向B培养瓶中加入等量的化学物质乙,并将培养瓶摇匀.
③向C瓶内加入等量生理盐水加入等量生理盐水.
(3)制作临时装片
①当细胞增殖到大约第8代左右时,同时从恒温箱中取出三个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,使培养的细胞从瓶壁上脱落,再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞.
②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,用适宜浓度龙胆紫溶液染色用适宜浓度龙胆紫溶液染色,3~5min后,盖上盖玻片.
(4)镜检和统计
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于细胞有丝分裂中细胞有丝分裂中期的细胞,并与C组C组对比以确认发生变异的细胞,同时统计该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值).
Ⅴ.结果与结论
经研究人员实验得知:A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%、QB=12.5%、QC=0.1%,由此可知该实验的结论是甲、乙都是有毒性的,且乙的毒性大于甲甲、乙都是有毒性的,且乙的毒性大于甲.
Ⅵ.回答问题
在实验中,C培养瓶起什么作用?对照对照.
【考点】动物细胞培养的条件与过程.
【答案】有毒物质能诱导细胞产生变异;消毒灭菌,加入等量的细胞悬浮液;加入等量生理盐水;用适宜浓度龙胆紫溶液染色;细胞有丝分裂中;C组;甲、乙都是有毒性的,且乙的毒性大于甲;对照
【解答】
【点评】
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