人类胰岛素基因位于第11号染色体上,长度8416bp,包含3个外显子和2个内含子,人类胰岛素的氨基酸序列已知。回答相关问题:

(1)如图是利用PCR技术获取人胰岛素基因的方法,除了此方法外,还可以利用的方法是从基因文库获取或人工合成从基因文库获取或人工合成。
(2)利用PCR技术获取人胰岛素基因,在缓冲液中除了要添加模板和引物外,还需要添加的物质有四种脱氧核苷酸和热稳定DNA聚合酶(Taq酶)四种脱氧核苷酸和热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。
(3)经过33轮循环可以得到所需的目的基因,一个DNA分子经过5轮循环,需要引物A3131个,从PCR的过程和DNA分子的特点,试着写出设计引物需要注意的问题引物自身不能有互补序列 引物之间不能有互补序列、引物长度适当、引物能与目的基因两侧特异性结合、避免与扩增DNA内有过多互补的序列引物自身不能有互补序列 引物之间不能有互补序列、引物长度适当、引物能与目的基因两侧特异性结合、避免与扩增DNA内有过多互补的序列(答出2点即可)。
(4)利用SDS-凝胶电泳分离不同DNA分子,迁移速度取决于DNA分子的大小DNA分子的大小。
(5)利用图示方法获取的目的基因,直接构建基因表达载体后导入大肠杆菌,能不能表达出人胰岛素,判断并说明理由不能,因为此方法获得的目的基因中含有内含子,大肠杆菌无法正常识别内含子而对内含子部分转录的mRNA进行翻译,导致合成的蛋白质出现错误不能,因为此方法获得的目的基因中含有内含子,大肠杆菌无法正常识别内含子而对内含子部分转录的mRNA进行翻译,导致合成的蛋白质出现错误。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定.
【答案】从基因文库获取或人工合成;四种脱氧核苷酸和热稳定DNA聚合酶(Taq酶);3;31;引物自身不能有互补序列 引物之间不能有互补序列、引物长度适当、引物能与目的基因两侧特异性结合、避免与扩增DNA内有过多互补的序列;DNA分子的大小;不能,因为此方法获得的目的基因中含有内含子,大肠杆菌无法正常识别内含子而对内含子部分转录的mRNA进行翻译,导致合成的蛋白质出现错误
【解答】
【点评】
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发布:2024/5/23 20:38:36组卷:30引用:4难度:0.6
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