科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图1:

(1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的细胞核细胞核。
(2)将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为ES细胞具有全能性ES细胞具有全能性。
(3)步骤③中,需要构建含有干扰素基因的基因表达载体基因表达载体。构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时,可以从图2中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取B和CB和C作为引物。对干扰素基因片段和质粒进行酶切时,可选用限制酶的组合为HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠHindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ。
(4)将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察,选择发绿绿色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否表达,可以采用抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交的方法。
【考点】干细胞的培养及其应用.
【答案】细胞核;ES细胞具有全能性;基因表达载体;B和C;HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ;绿;抗原-抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:677引用:6难度:0.7