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如图为cDNA文库构建的部分示意图,请据图回答:

(1)①表示
反转录
反转录
过程,需要添加的原料是
脱氧核苷酸
脱氧核苷酸

(2)①过程所用的酶与所有的DNA聚合酶相似,不能
在两个游离的脱氧核苷酸之间催化形成磷酸二酯键
在两个游离的脱氧核苷酸之间催化形成磷酸二酯键
,需要添加引物。由于大多数真核生物的mRNA3′端为多聚腺苷酸,因此,可以设计以
Oligo dT
Oligo dT
为引物。
(3)②、③过程表示用大肠杆菌 RNase把DNA-RNA杂交分子中的RNA链降解成许多片段,以残余的RNA为引物合成互补链,并经过一系列过程去除中间的引物,由此形成的互补链处于间断状态,所以④过程须添加
DNA连接酶
DNA连接酶
酶,形成
3,
3,
端带有小段RNA的双链cDNA。
(4)cDNA可以用PCR技术扩增,一般设计长度在15-30个碱基之间的
种引物,引物过长,会导致与模板DNA的杂交效率下降,使PCR的反应效率
降低
降低
。PCR时,预变性设置的时间明显长于变性时间,目的是
使DNA充分变性,减少DNA复杂结构对扩增的影响,以利于引物更好的和模板结合
使DNA充分变性,减少DNA复杂结构对扩增的影响,以利于引物更好的和模板结合

【答案】反转录;脱氧核苷酸;在两个游离的脱氧核苷酸之间催化形成磷酸二酯键;Oligo dT;DNA连接酶;3,;两;降低;使DNA充分变性,减少DNA复杂结构对扩增的影响,以利于引物更好的和模板结合
【解答】
【点评】
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发布:2024/12/29 8:0:2组卷:3引用:1难度:0.7
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括
     
     

    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
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