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如图为cDNA文库构建的部分示意图,请据图回答:

(1)①表示 反转录反转录过程,需要添加的原料是 脱氧核苷酸脱氧核苷酸。
(2)①过程所用的酶与所有的DNA聚合酶相似,不能 在两个游离的脱氧核苷酸之间催化形成磷酸二酯键在两个游离的脱氧核苷酸之间催化形成磷酸二酯键,需要添加引物。由于大多数真核生物的mRNA3′端为多聚腺苷酸,因此,可以设计以 Oligo dTOligo dT为引物。
(3)②、③过程表示用大肠杆菌 RNase把DNA-RNA杂交分子中的RNA链降解成许多片段,以残余的RNA为引物合成互补链,并经过一系列过程去除中间的引物,由此形成的互补链处于间断状态,所以④过程须添加 DNA连接酶DNA连接酶酶,形成 3,3,端带有小段RNA的双链cDNA。
(4)cDNA可以用PCR技术扩增,一般设计长度在15-30个碱基之间的 两两种引物,引物过长,会导致与模板DNA的杂交效率下降,使PCR的反应效率 降低降低。PCR时,预变性设置的时间明显长于变性时间,目的是 使DNA充分变性,减少DNA复杂结构对扩增的影响,以利于引物更好的和模板结合使DNA充分变性,减少DNA复杂结构对扩增的影响,以利于引物更好的和模板结合。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】反转录;脱氧核苷酸;在两个游离的脱氧核苷酸之间催化形成磷酸二酯键;Oligo dT;DNA连接酶;3,;两;降低;使DNA充分变性,减少DNA复杂结构对扩增的影响,以利于引物更好的和模板结合
【解答】
【点评】
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发布:2024/12/29 8:0:2组卷:3引用:1难度:0.7
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