解磷菌是土壤中的一类功能微生物,通过自身分泌的有机酸和磷酸酶等代谢产物,能使土壤中难溶性或不溶性的磷转化成易于被植物吸收利用的有效态磷。从土壤中分离纯化解磷菌的步骤如下:

(1)按规范流程配制蒙金娜无机磷(磷酸三钙)培养基(见表格):计算、称量、溶化和 调pH、灭菌调pH、灭菌后倒平板。从功能来看,此培养基属于 选择选择培养基,其中酵母膏中含有的主要营养物质为 碳源、氮源、生长因子(或特殊营养物质)碳源、氮源、生长因子(或特殊营养物质)(填1种)。
物质 | 葡萄糖 | (NH4)2SO4 | NaCl | KCl | FeSO4•7H2O | MgSO4•7H2O | MnSO4•H2O | CaCO3 | 酵母膏 | 磷酸三钙 | 琼脂 |
质量/g | 10 | 0.5 | 3 | 0.3 | 0.03 | 0.3 | 0.03 | 5 | 0.4 | 20 | 30 |
1
1
g,溶于9mL无菌水中,10倍稀释法分别将梯度稀释至10-1~10-6倍,可选择 10-4、10-5、10-6g/mL
10-4、10-5、10-6g/mL
3个稀释倍数用移液枪吸取100μL土壤稀释液涂布至上述培养基中,37℃培养5d。观察出现解磷圈(透明圈)菌落的解磷圈直径(D)、菌落直径(d),以此初步确定菌株的解磷能力。已知接种的四个平板上的菌落数分别为215、236、312和254,每毫升土壤原液中的解磷菌活菌数约为2.35×108个,则土壤原液的稀释倍数为 10-5
10-5
倍。(3)从上述菌中找到解磷能力最强的菌进行扩大培养,并进行了磷酸酶的提取和分离,为了鉴定磷酸酶的分子纯度可以采用
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
(方法)。(4)将解磷能力最强菌重新接种振荡培养的菌悬液1mL,与1mL LB甘油液体培养基(含质量分数为40%的甘油),在2mL保藏管内混匀(甘油最终质量分数为20%),标记好菌株名称、日期,保存于
-20
-20
℃冰箱。【答案】调pH、灭菌;选择;碳源、氮源、生长因子(或特殊营养物质);1;10-4、10-5、10-6g/mL;10-5;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳;-20
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:14引用:1难度:0.7
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1.回答下列关于微生物的问题.
阿拉伯胶是一种多糖,研究者从某地合欢树下距离地表深10~15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01,以下为该菌株的鉴定过程.
(1)为获得单菌落,可采用平板划线法或
A.细胞膜 B.核糖体 C.拟核 D.荚膜
(2)表中培养液pH均为6.0,若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定,则应选用表中的
①缺少
②具有
③缺乏
表 试验用培养液配方培养液 阿拉伯胶 阿拉伯胶酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4•7H2O KCl FeSO4•7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L发布:2025/1/2 8:0:1组卷:6引用:1难度:0.5 -
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(2)驯化脱硫细菌:将筛选出的脱硫细菌接种于有少量无菌水的三角瓶中,边搅拌边持续通入SO2气体几分钟,然后接种到培养基上,待长出菌落后再重复上述步骤,并逐步延长通SO2的时间,同时逐步降低培养基的pH.此操作的目的是分离出
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