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解磷菌是土壤中的一类功能微生物,通过自身分泌的有机酸和磷酸酶等代谢产物,能使土壤中难溶性或不溶性的磷转化成易于被植物吸收利用的有效态磷。从土壤中分离纯化解磷菌的步骤如下:

(1)按规范流程配制蒙金娜无机磷(磷酸三钙)培养基(见表格):计算、称量、溶化和
调pH、灭菌
调pH、灭菌
后倒平板。从功能来看,此培养基属于
选择
选择
培养基,其中酵母膏中含有的主要营养物质为
碳源、氮源、生长因子(或特殊营养物质)
碳源、氮源、生长因子(或特殊营养物质)
(填1种)。
物质 葡萄糖 (NH42SO4 NaCl KCl FeSO4•7H2O MgSO4•7H2O MnSO4•H2O CaCO3 酵母膏 磷酸三钙 琼脂
质量/g 10 0.5 3 0.3 0.03 0.3 0.03 5 0.4 20 30
(2)称取土壤
1
1
g,溶于9mL无菌水中,10倍稀释法分别将梯度稀释至10-1~10-6倍,可选择
10-4、10-5、10-6g/mL
10-4、10-5、10-6g/mL
3个稀释倍数用移液枪吸取100μL土壤稀释液涂布至上述培养基中,37℃培养5d。观察出现解磷圈(透明圈)菌落的解磷圈直径(D)、菌落直径(d),以此初步确定菌株的解磷能力。已知接种的四个平板上的菌落数分别为215、236、312和254,每毫升土壤原液中的解磷菌活菌数约为2.35×108个,则土壤原液的稀释倍数为
10-5
10-5
倍。
(3)从上述菌中找到解磷能力最强的菌进行扩大培养,并进行了磷酸酶的提取和分离,为了鉴定磷酸酶的分子纯度可以采用
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
(方法)。
(4)将解磷能力最强菌重新接种振荡培养的菌悬液1mL,与1mL  LB甘油液体培养基(含质量分数为40%的甘油),在2mL保藏管内混匀(甘油最终质量分数为20%),标记好菌株名称、日期,保存于
-20
-20
℃冰箱。

【答案】调pH、灭菌;选择;碳源、氮源、生长因子(或特殊营养物质);1;10-4、10-5、10-6g/mL;10-5;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳;-20
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:14引用:1难度:0.7
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  • 1.回答下列关于微生物的问题.
    阿拉伯胶是一种多糖,研究者从某地合欢树下距离地表深10~15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01,以下为该菌株的鉴定过程.
    (1)为获得单菌落,可采用平板划线法或
     
    法将初筛菌液接种在
     
    培养基上.46SM01菌落为粉白色,初期呈突起絮状,在显微镜下观察到,菌丝白色致密,且有分生孢子,细胞核直径约1μm,初步推测为真菌,则其特征中,最能说明SM01是真菌的是有细胞核,且有分生孢子.SM01还一定具有的结构有(多选)
     

    A.细胞膜    B.核糖体    C.拟核    D.荚膜
    (2)表中培养液pH均为6.0,若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定,则应选用表中的
     
    培养液,针对不选用的其他培养液,分别说明原因:
    ①缺少
     
    ,SM01不能很好生长
    ②具有
     
    ,会影响对SM01自身产生的酶活力的测定结果
    ③缺乏
     
    ,会影响SM01的生长,也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定.
    表 试验用培养液配方
     培养液 阿拉伯胶  阿拉伯胶酶   NaNO3  牛肉膏  K2SOPO4  MgSO4•7H2O KCl FeSO4•7H2O
     
     A
     25g/L
     __  __  __
     g/L

     g/L

     g/L
     g/L
     B
     25g/L

     g/L
     __
     g/L

     g/L

     g/L

     g/L

     g/L
     C  __  __
     g/L
     __
     g/L

     g/L

     g/L

     g/L
     D
     25g/L
     __
     g/L
     __
     g/L

     g/L

     g/L

     g/L

    发布:2025/1/2 8:0:1组卷:6引用:1难度:0.5
  • 2.丙草胺(C15H22ClNO2)是一种广泛应用的除草剂,能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株,并对其计数(如图所示),以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列叙述错误的是(  )

    发布:2024/12/31 4:0:1组卷:17引用:3难度:0.7
  • 3.为了防治大气污染,烟气脱硫是环保领域迫切需要解决的问题.研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌,并了解其生长规律,进行了如下操作.请回答下列问题:
    (1)采样与细菌的筛选:在某热电厂烟囱周围区域要尽量做到
     
    采集土样.为确保能够从样品中分离到所需要的烟气脱硫细菌,可以通过
     
    增加脱硫菌的浓度.
    (2)驯化脱硫细菌:将筛选出的脱硫细菌接种于有少量无菌水的三角瓶中,边搅拌边持续通入SO2气体几分钟,然后接种到培养基上,待长出菌落后再重复上述步骤,并逐步延长通SO2的时间,同时逐步降低培养基的pH.此操作的目的是分离出
     
    的脱硫细菌.
    (3)培养与观察:一般来说,在一定的培养条件下(相同的培养基、温度及培养时间),驯化后的脱硫细菌表现出稳定的
     
    特征.用高倍显微镜
     
    (填“可以”或“不可以”)观察到脱硫细菌的核糖体.
    (4)探究生长规律:在计数时,计数方法有稀释涂布平板法和
     
    直接计数法.在用稀释涂布平板法进行计数时,当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的
     
    ;通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌,通常推测统计的菌落数往往比活菌的实际数目
     

    发布:2025/1/1 8:0:2组卷:6引用:2难度:0.5
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