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在繁殖期间,大熊猫雄性和雌性都可与多个异性交配。动物园圈养时,为避免后代近亲交配,导致群体生活力下降,需确定未知的亲子关系。简单重复序列(SSR)也称微卫星DNA,它在大熊猫个体之间具有丰富的多样性,可用于亲子鉴定。请回答问题:
(1)大肠杆菌pUC18质粒上的LacZ基因序列中没有插入目的基因时,在外源IPTC诱导下可表达出β-半乳糖苷酶,将培养基中的X-gal水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之,则形成白色菌落。科学家利用pUC18质粒,通过构建基因文库筛选大熊猫SSR位点(见图1)。

①提取大熊猫基因组DNA,用同种限制性核酸内切酶和DNA连接酶同种限制性核酸内切酶和DNA连接酶处理DNA和pUC18质粒,获得重组质粒后,将其与钙离子钙离子处理的大肠杆菌悬液混合,完成转化。
②将试管Ⅱ中的菌液接种于选择培养基上培养,培养基中应含有大肠杆菌必需的营养物质和生长因子,还应加入IPTG、X-galIPTG、X-gal以及氨苄青霉素,其中加入氨苄青霉素的作用是筛选出导入pUC18质粒和重组质粒筛选出导入pUC18质粒和重组质粒的大肠杆菌。
③观察到培养基上出现白白色菌落,则说明大肠杆菌中已成功导入了重组质粒,取该颜色菌落筛选SSR位点,进行测序,并设计引物通过PCR扩增SSR位点。
(2)科学家对PCR扩增的SSR位点,对大熊猫进行亲子鉴定结果如图2:由于基因突变的频率较低,因此,子代1和子代2子代2是母本与疑似父本2的后代,而子代3子代3不是该母本的后代。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】同种限制性核酸内切酶和DNA连接酶;钙离子;IPTG、X-gal;筛选出导入pUC18质粒和重组质粒;白;子代2;子代3
【解答】
【点评】
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发布:2024/5/23 20:38:36组卷:23引用:2难度:0.6
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