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在繁殖期间,大熊猫雄性和雌性都可与多个异性交配。动物园圈养时,为避免后代近亲交配,导致群体生活力下降,需确定未知的亲子关系。简单重复序列(SSR)也称微卫星DNA,它在大熊猫个体之间具有丰富的多样性,可用于亲子鉴定。请回答问题:
(1)大肠杆菌pUC18质粒上的LacZ基因序列中没有插入目的基因时,在外源IPTC诱导下可表达出β-半乳糖苷酶,将培养基中的X-gal水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之,则形成白色菌落。科学家利用pUC18质粒,通过构建基因文库筛选大熊猫SSR位点(见图1)。

①提取大熊猫基因组DNA,用
同种限制性核酸内切酶和DNA连接酶
同种限制性核酸内切酶和DNA连接酶
处理DNA和pUC18质粒,获得重组质粒后,将其与
钙离子
钙离子
处理的大肠杆菌悬液混合,完成转化。
②将试管Ⅱ中的菌液接种于选择培养基上培养,培养基中应含有大肠杆菌必需的营养物质和生长因子,还应加入
IPTG、X-gal
IPTG、X-gal
以及氨苄青霉素,其中加入氨苄青霉素的作用是
筛选出导入pUC18质粒和重组质粒
筛选出导入pUC18质粒和重组质粒
的大肠杆菌。
③观察到培养基上出现
色菌落,则说明大肠杆菌中已成功导入了重组质粒,取该颜色菌落筛选SSR位点,进行测序,并设计引物通过PCR扩增SSR位点。
(2)科学家对PCR扩增的SSR位点,对大熊猫进行亲子鉴定结果如图2:由于基因突变的频率较低,因此,子代1和
子代2
子代2
是母本与疑似父本2的后代,而
子代3
子代3
不是该母本的后代。

【答案】同种限制性核酸内切酶和DNA连接酶;钙离子;IPTG、X-gal;筛选出导入pUC18质粒和重组质粒;白;子代2;子代3
【解答】
【点评】
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发布:2024/5/23 20:38:36组卷:23引用:2难度:0.6
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    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
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