研究人员将抗盐基因转入普通烟草培育出抗盐烟草，该过程所用的质粒与含抗盐基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示。限制性内切核酸酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。图3表示该过程中利用含目的基因的农杆菌进行转化作用的示意图。
（1）图1质粒中没有标注出来的基本结构是 复制原点复制原点。
（2）用图中质粒和目的基因构建基因表达载体时，可以用限制酶BamHⅠ切割质粒，用限制酶Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段，可以这样做的原因是这两种限制酶可以 目的基因应位于启动子和终止子之间；且为了防止目的基因和运载体的任意连接，不采用同种限制酶，破坏Y抗生素基因更加有利于目的基因的检测与鉴定，不用图中的HindⅢ，BamHⅠ、BclⅠ的识别序列包含Sau3AⅠ的识别序列，因此应选用限制酶BamHⅠ切割质粒，选用Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段目的基因应位于启动子和终止子之间；且为了防止目的基因和运载体的任意连接，不采用同种限制酶，破坏Y抗生素基因更加有利于目的基因的检测与鉴定，不用图中的HindⅢ，BamHⅠ、BclⅠ的识别序列包含Sau3AⅠ的识别序列，因此应选用限制酶BamHⅠ切割质粒，选用Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段。限制酶切断的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的 磷酸二酯键磷酸二酯键，该过程还需要水作为反应物。
（3）将上述切开的质粒与目的基因混合，加入DNA连接酶连接后，导入受体细胞（不考虑基因突变），受体细胞的类型包含 ABDABD。
A.抗X、抗Y
B.抗X、不抗Y
C.不抗X、抗Y
D.不抗X、不抗Y
（4）图3过程 ①①（填序号）中发生了基因重组，过程②、③所用的培养基中，通常要调控好 生长素和细胞分裂素生长素和细胞分裂素两类激素的比例。
（5）鉴定抗盐转基因烟草是否抗盐的方法是 用一定浓度盐水浇灌转基因幼苗或将其移栽到盐碱地中观察其生长状态用一定浓度盐水浇灌转基因幼苗或将其移栽到盐碱地中观察其生长状态，观察转基因烟草的生长状况。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】复制原点；目的基因应位于启动子和终止子之间；且为了防止目的基因和运载体的任意连接，不采用同种限制酶，破坏Y抗生素基因更加有利于目的基因的检测与鉴定，不用图中的HindⅢ，BamHⅠ、BclⅠ的识别序列包含Sau3AⅠ的识别序列，因此应选用限制酶BamHⅠ切割质粒，选用Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段；磷酸二酯键；ABD；①；生长素和细胞分裂素；用一定浓度盐水浇灌转基因幼苗或将其移栽到盐碱地中观察其生长状态
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：8引用：1难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
