图1为胰岛素基因结构，图2为pBR322质粒的结构示意图，图中EcorⅠ、SmaⅠ、BamHⅠ和HindⅢ为限制酶，箭头或线段所指为位点对应酶切位点。研究人员欲用此质粒构建胰岛素基因的表达载体，培育能产生人胰岛素的大肠杆菌。请回答下列相关问题：
（1）若要进行胰岛素基因的扩增，常采用PCR技术，该技术的原理是 DNA双链复制DNA双链复制。使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是 加热到90～95℃加热到90～95℃。
（2）已知DNA新链的合成方向是5′→3′，若利用图2中的质粒构建基因表达载体，应该选择的引物为 引物4和引物5引物4和引物5。目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因 Taq酶热稳定性高，而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下会失活Taq酶热稳定性高，而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下会失活。
（3）在构建基因表达载体时，选择 BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ作为切割质粒和目的基因的限制酶，可提高目的基因和运载体的正确连接效率，避免目的基因末端发生任意连接。
（4）成功构建的基因表达载体应含有人胰岛素基因、标记基因、启动子及终止子等，其中标记基因的作用是 鉴别受体细胞中是否含有目的基因，并把含有目的基因的受体细胞筛选出来鉴别受体细胞中是否含有目的基因，并把含有目的基因的受体细胞筛选出来。
（5）限制酶的特点是 能够识别双链DNA分子中的某种特定序列，并在特定位点切割DNA分子能够识别双链DNA分子中的某种特定序列，并在特定位点切割DNA分子。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】DNA双链复制；加热到90～95℃；引物4和引物5；Taq酶热稳定性高，而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下会失活；BamHⅠ和HindⅢ；鉴别受体细胞中是否含有目的基因，并把含有目的基因的受体细胞筛选出来；能够识别双链DNA分子中的某种特定序列，并在特定位点切割DNA分子
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/6/27 10:35:59组卷：13引用：1难度：0.4
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
