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酵母菌絮凝是指菌体细胞间通过细胞壁相互粘附、聚集成团的现象。适当提高酵母菌的絮凝能力,有助于发酵结束时细胞和产物的分离,可大幅节约生产成本。科研人员利用基因工程改造酵母菌,使其絮凝能力提升。
(1)酵母菌的R基因对絮凝能力有一定的抑制作用,图1表示科研人员利用同源重组(在两个DNA分子的同源序列之间直接交换的一种重组)基因敲除技术敲除R基因的过程。

①研究人员将整合了lox序列的庆大霉素抗性基因导入酵母菌,lox-庆大霉素抗性基因通过同源重组的方式整合到酵母菌基因组中,重组片段上庆大霉素抗性基因的作用是
作为标记基因,用于筛选出R基因敲除突变菌株
作为标记基因,用于筛选出R基因敲除突变菌株

②利用含有庆大霉素的培养基获得单菌落,再挑取单菌落进行PCR扩增,若要验证庆大霉素抗性基因是否替换R基因,则扩增时选择图2中的引物是
引物1
引物1
引物6
引物6
,在PCR延伸阶段中
耐高温的DNA聚合酶
耐高温的DNA聚合酶
催化脱氧核苷酸连接到引物的
3′
3′
端。
③给酵母菌导入PC质粒,并将其置于添加
乳糖
乳糖
的培养基中,获得敲除R基因且无庆大霉素抗性基因标记的R菌。
(2)科研人员对野生菌株和R基因敲除菌株的酒精发酵能力和絮凝能力进行了测定,实验结果表明,获得了R基因敲除且不影响酒精发酵能力的符合人类生产需求的菌株。请在图3中依据实验结果补充实验数据。

【答案】作为标记基因,用于筛选出R基因敲除突变菌株;引物1;引物6;耐高温的DNA聚合酶;3′;乳糖
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:38引用:1难度:0.5
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    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

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