凝乳酶能够使乳汁中的蛋白质凝聚形成奶酪，主要来源为未断奶的小牛胃黏膜。随着社会发展，传统来源的凝乳酶已不能满足生产需要。研究人员利用PCR技术扩增了目的基因，并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌，从而获得足够的凝乳酶。回答下列问题：
（1）凝乳酶基因可从构建的凝乳酶基因组文库中获取，也可从以 mRNAmRNA为模板形成的cDNA文库中获取，从前者获取的凝乳酶基因 含有含有（填“含有”或“不含有”）启动子。将目的基因导入酵母菌时通常选择 质粒质粒作为运载体。
（2）PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含ATP和Mg2+）、4种脱氧核苷酸、模板DNA、引物4种脱氧核苷酸、模板DNA、引物和Taq 酶。使用 Taq 酶而不使用酵母菌 DNA 聚合酶的主要原因是 Taq酶热稳定性高，而酵母菌DNA聚合酶在高温下会失活Taq酶热稳定性高，而酵母菌DNA聚合酶在高温下会失活。
（3）在体外利用 PCR技术扩增目的基因时，解旋是破坏了 DNA 双链分子中的 氢键氢键。延伸是沿子链的3′端延伸，使目的基因成 指数指数增长。
（4）分子水平上检测目的基因是否成功导入酵母菌的方法是 DNA分子杂交DNA分子杂交。
【考点】基因工程的操作过程综合；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】mRNA；含有；质粒；4种脱氧核苷酸、模板DNA、引物；Taq酶热稳定性高，而酵母菌DNA聚合酶在高温下会失活；氢键；指数；DNA分子杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：4引用：1难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
