凝乳酶是奶制品加工中经常用到的一种酶,其传统制备方法的产量远远不能满足生产需要。科学家研究利用基因工程技术生产凝乳酶,其部分环节如图所示。请据图回答问题:

(1)从刚出生5天的小牛皱胃组织中提取总RNA,经 逆转录逆转录过程获得总cDNA。通过PCR技术可在总cDNA中专一性扩增出凝乳酶基因,原因是 引物是根据凝乳酶基因的一段已知序列设计合成的(或引物能与凝乳酶基因的cDNA 特异性结合)引物是根据凝乳酶基因的一段已知序列设计合成的(或引物能与凝乳酶基因的cDNA 特异性结合)。
(2)过程①所使用的工具酶有 限制酶和DNA连接酶限制酶和DNA连接酶。凝乳酶基因和质粒上均有NdeⅠ和XhoⅠ两种酶的识别序列,分别是-C↓ATATG-,-C↓TCGAG-。用以上两种酶分别切割目的基因和质粒,得到的黏性末端分别为 -TATA和-AGCT--TATA和-AGCT-。
(3)大肠杆菌作为凝乳酶基因受体细胞的主要优点有 繁殖快、易培养、产量高,且遗传物质相对较少繁殖快、易培养、产量高,且遗传物质相对较少(至少答出两点)。用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是 未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱。
(4)筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌,经多代培养后,仍能从大肠杆菌中提取出凝乳酶基因。据此判断,你认为凝乳酶基因是否已在大肠杆菌中成功转化?请说明你的观点及理由:不能。理由是大肠杆菌中检测到凝乳酶基因,说明目的基因已经成功导入大肠杆菌中,但不能说明凝乳酶基因已经成功转化不能。理由是大肠杆菌中检测到凝乳酶基因,说明目的基因已经成功导入大肠杆菌中,但不能说明凝乳酶基因已经成功转化。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】逆转录;引物是根据凝乳酶基因的一段已知序列设计合成的(或引物能与凝乳酶基因的cDNA 特异性结合);限制酶和DNA连接酶;-TATA和-AGCT-;繁殖快、易培养、产量高,且遗传物质相对较少;未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱;不能。理由是大肠杆菌中检测到凝乳酶基因,说明目的基因已经成功导入大肠杆菌中,但不能说明凝乳酶基因已经成功转化
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:6引用:1难度:0.7
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