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凝乳酶是奶制品加工中经常用到的一种酶,其传统制备方法的产量远远不能满足生产需要。科学家研究利用基因工程技术生产凝乳酶,其部分环节如图所示。请据图回答问题:

(1)从刚出生5天的小牛皱胃组织中提取总RNA,经
逆转录
逆转录
过程获得总cDNA。通过PCR技术可在总cDNA中专一性扩增出凝乳酶基因,原因是
引物是根据凝乳酶基因的一段已知序列设计合成的(或引物能与凝乳酶基因的cDNA 特异性结合)
引物是根据凝乳酶基因的一段已知序列设计合成的(或引物能与凝乳酶基因的cDNA 特异性结合)

(2)过程①所使用的工具酶有
限制酶和DNA连接酶
限制酶和DNA连接酶
。凝乳酶基因和质粒上均有NdeⅠ和XhoⅠ两种酶的识别序列,分别是-CATATG-,-CTCGAG-。用以上两种酶分别切割目的基因和质粒,得到的黏性末端分别为
-TATA和-AGCT-
-TATA和-AGCT-

(3)大肠杆菌作为凝乳酶基因受体细胞的主要优点有
繁殖快、易培养、产量高,且遗传物质相对较少
繁殖快、易培养、产量高,且遗传物质相对较少
(至少答出两点)。用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是
未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱
未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱

(4)筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌,经多代培养后,仍能从大肠杆菌中提取出凝乳酶基因。据此判断,你认为凝乳酶基因是否已在大肠杆菌中成功转化?请说明你的观点及理由:
不能。理由是大肠杆菌中检测到凝乳酶基因,说明目的基因已经成功导入大肠杆菌中,但不能说明凝乳酶基因已经成功转化
不能。理由是大肠杆菌中检测到凝乳酶基因,说明目的基因已经成功导入大肠杆菌中,但不能说明凝乳酶基因已经成功转化

【答案】逆转录;引物是根据凝乳酶基因的一段已知序列设计合成的(或引物能与凝乳酶基因的cDNA 特异性结合);限制酶和DNA连接酶;-TATA和-AGCT-;繁殖快、易培养、产量高,且遗传物质相对较少;未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱;不能。理由是大肠杆菌中检测到凝乳酶基因,说明目的基因已经成功导入大肠杆菌中,但不能说明凝乳酶基因已经成功转化
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:6引用:1难度:0.7
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    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:6引用:1难度:0.7
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括
     
     

    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
  • 3.下列有关基因工程的叙述,正确的是(  )

    发布:2024/12/31 5:0:5组卷:3引用:2难度:0.7
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