亮氨酸脱氢酶是一类氧化还原酶，在临床生化诊断上有重要作用。有研究表明，在亮氨酸脱氢酶基因原有启动子（PHpaII）之后加上信号肽（引导新合成的蛋白质向分泌通路转移的一段肽链）序列，可提高亮氨酸脱氢酶产量。科研人员进一步研究双启动子（PHpaII、PamyQ）及双启动子后再分别添加3种信号肽序列对亮氨酸脱氢酶产量的影响，主要实验流程如图。请回答下列问题。
（1）启动子的功能是 RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动转录RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动转录。组成信号肽的基本单位是 氨基酸氨基酸。
（2）过程①中，PCR反应体系中添加的dNTP的功能有 作为原料、提供能量作为原料、提供能量，添加的一对引物是 P1和P3P1和P3。
P1：5′-GGGAATCATATGGGCGGCGTTCTGTTTCTG-3′
P2：5′-CCGATTAAGCTTGGCGGCGTTCTGCATCTG-3′
P3：5′-CGCGGATCCATAAGGCAGTAAAGAGGCTTTTG-3′
P4：5′-GCCGGATCCACAAGGCAGTATTTACTGCCTT-3′
（3）过程②中，启动子PamyQ能与质粒1连接的分子基础是 都是由脱氧核苷酸构成的双链结构都是由脱氧核苷酸构成的双链结构。将重组质粒1导入枯草杆菌前先用Ca2+处理枯草杆菌，其主要目的是 使枯草杆菌处于感受态使枯草杆菌处于感受态。转化后的枯草杆菌一般要用稀释涂布平板法接种到添加 卡那霉素卡那霉素的培养基上进行筛选。
（4）科研人员将质粒1、重组质粒1和3种重组质粒2分别导入枯草杆菌得到甲～戊5种重组枯草杆菌，进行发酵后提取上清液中的亮氨酸脱氢酶，酶活力测定结果如表。
| 重组菌 | 甲 | 乙 | 丙 | 丁 | 戊 |
| 酶活力/U•mL-1 | 10.11 | 31.24 | 0.44 | 6.49 | 21.76 |
添加双启动子
添加双启动子
最有利于提高亮氨酸脱氢酶产量。②双启动子后添加信号肽序列影响酶的表达或分泌量的原因可能有
ac
ac
。a.信号肽序列影响了亮氨酸脱氢酶基因的表达
b.信号肽序列影响了启动子转录成相应的mRNA序列
c.信号肽序列表达产物使亮氨酸脱氢酶分泌路径发生改变
【考点】基因工程的操作过程综合；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动转录；氨基酸；作为原料、提供能量；P1和P3；都是由脱氧核苷酸构成的双链结构；使枯草杆菌处于感受态；卡那霉素；添加双启动子；ac
【解答】
【点评】
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发布：2024/11/26 16:0:1组卷：39引用：4难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
