四尾栅藻具有环境适应能力强和生长速度快等优点，如果能将其进行品种改良，提高含油量，有望解决微藻生物柴油产业化进程的瓶颈。研究人员利用基因工程技术将油料作物紫苏DGAT1基因导入四尾栅藻，获得转基因的产油微藻，利用地热废水培养，不仅能生产生物柴油，还能治理地热废水。操作过程如图，请回答下列问题：
注：LacZ基因编码产生的酶可以分解白色物质X-gal,从而使菌落显现出蓝色。若无该基因或该基因被破坏，则菌落呈白色
（1）将质粒pMD19-DGAT1导入大肠杆菌前，通常先用 CaCl2CaCl2处理大肠杆菌，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
（2）图中接种大肠杆菌的培养基pH 一般为 中性或弱碱性（中性偏碱）中性或弱碱性（中性偏碱）。为了便于重组质粒的筛选，该选择培养基中应添加 氨苄青霉素和X-gal氨苄青霉素和X-gal。 白色白色（填“白色”或“蓝色”）菌落的大肠杆菌中导入了目的基因。
（3）将质粒pMD19-DGAT1导入大肠杆菌的目的是 扩增目的基因（DGAT1基因）扩增目的基因（DGAT1基因）。
（4）由上图推测，用 BamHIBamHI和 XbaIXbaI酶切割pMD19-DGAT1获得DGAT1基因，并与酶切后的载体pBI121连接再次构建基因表达载体，用这两种酶切割是为了有效避免 反向连接和自身环化反向连接和自身环化。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】CaCl2；中性或弱碱性（中性偏碱）；氨苄青霉素和X-gal；白色；扩增目的基因（DGAT1基因）；BamHI；XbaI；反向连接和自身环化
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：11引用：1难度：0.6
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
