传统的由小鼠杂交瘤细胞产生的单克隆抗体称为鼠源性单抗。这种单抗在应用至人体时,可能被人体当作“异物”,从而引发一些不良反应。解决的方案之一是用完全由人类抗体基因编码的全人源抗体替代鼠源性抗体。如图是针对某种病毒的全人源单克隆抗体的制备技术流程图。结合图示及所学知识,回答下列问题:

(1)从免疫学的角度推测,鼠源性单抗应用至人体时,可能引发的不良反应有过敏反应过敏反应(答出一点即可)。
(2)科学家从康复者而不从未感染者的血液中分离单个B细胞,原因是康复者的血液中含有分泌该种病毒的特异性抗体的浆细胞,而未感染者的血液中不含康复者的血液中含有分泌该种病毒的特异性抗体的浆细胞,而未感染者的血液中不含。
(3)从B细胞中提取的mRNA,需经过逆转录逆转录过程并经PCRPCR扩增,才能得到大量的特异性抗体基因。
(4)为达到长期从细胞培养液中获得单克隆抗体的目的,作为目的基因受体的哺乳动物细胞应具备既能无限增殖(分裂能力强),又具有分泌能力既能无限增殖(分裂能力强),又具有分泌能力的特点。转入的全人源单抗基因能够在其他哺乳动物细胞表达的原因是几乎所有的生物共用一套遗传密码几乎所有的生物共用一套遗传密码。
【答案】过敏反应;康复者的血液中含有分泌该种病毒的特异性抗体的浆细胞,而未感染者的血液中不含;逆转录;PCR;既能无限增殖(分裂能力强),又具有分泌能力;几乎所有的生物共用一套遗传密码
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:31引用:2难度:0.7
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1.学习以下材料,回答(1)~(4)题。
利用抑制性tRNA进行无义突变遗传病的治疗
无义突变是由于某个碱基的改变使代表某种氨基酸的密码子突变为终止密码子(UAA、UAG或UGA),从而使肽链合成提前终止,造成蛋白质的功能改变,引发相关疾病。约有10%~15%的人类基因相关遗传疾病是由无义突变引发的。常规的基因治疗是将正常基因的cDNA序列或是有治疗价值的基因(如CRISPR-Cas9相关的基因编辑工具)通过一定的方式导入人体靶细胞内,达到替代或修复缺陷基因、治疗疾病的目的。导入基因插入位置不当、过高或过低表达,都可能会导致副作用。尽管基因编辑可以实现生理水平的基因表达,但基因编辑工具引入外源蛋白可能引发强烈的免疫反应仍然是巨大的挑战。
抑制性tRNA(sup-tRNA)由天然tRNA改造而来,它的反密码子通过碱基配对原则可以识别无义突变的终止密码子,使得mRNA在翻译至无义突变位点时不启动翻译终止而是继续向后进行翻译,获得有功能的全长蛋白。
I型黏多糖贮积症的病因,是相关基因发生无义突变,产生终止密码子UAG。研究者构建小鼠该突变基因mldua和Flag基因融合的载体(图1),以及针对该无义突变设计的sup-tRNA表达载体(产生的sup-tRNA能够识别UAG并携带酪氨酸Tyr,简写作sup-tRNATyr),将其导入细胞进行研究,发现与具有相似作用的化合物G418比较,sup--tRNA的作用更加显著(图2);进一步利用重组腺相关病毒作为载体将sup-tRNA导入患病小鼠模型中,实验显示能够降低黏多糖过度积存,实现对该病症的有效治疗,其疗效可以持续半年以上。
从整体来看,G418在促进跨越无义突变位点继续翻译时引入的氨基酸较为随机,而sup-tRNA引入的氨基酸较为单一,且不会影响内源tRNA稳态,所以sup-tRNA在个体治疗中具有很高的安全性,因而在未来基因突变引起的疾病相关治疗中具有非常大的应用前景。
(1)侵染时,作为载体的重组腺相关病毒与靶细胞膜上的
(2)除了引入的氨基酸较为单一,不影响内源tRNA稳态,我们还可推断,用于治疗的sup-tRNA在正常终止密码子处
(3)研究者构建mldua突变基因和Flag基因融合的载体,目的是通过检测
(4)有文献报道,已在近1000个不同的人类基因中发现了7500多个无义突变。常规的基因治疗需要为每种疾病设计独特的治疗策略,这将是一项耗费惊人的项目。据此说明sup-tRNA的应用价值。发布:2025/1/3 8:0:1组卷:28引用:1难度:0.6 -
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3.几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,自然界有些植物能产生几丁质酶催化几丁质水解从而抵抗真菌感染。通过基因工程将几丁质酶基因转入没有抗性的植物体内,可增强其抗真菌的能力。如图表示为获取几丁质酶基因而建立cDNA文库的过程。
(1)图示以mRNA为材料通过
(2)与选用老叶相比,选用嫩叶更容易提取到mRNA,原因是
(3)将从cDNA文库中获得的几丁质酶基因和质粒载体用发布:2025/1/5 8:0:1组卷:5引用:1难度:0.7