在防治蔬菜病虫害方面，科学家利用苏云金芽孢杆菌和具有内生及防病等优良性状的枯草芽孢杆菌进行原生质体融合，构建了多功能工程菌，其作用效果与黄瓜叶枯病病菌的作用效果相反，对小菜蛾的校正杀虫率在59%以上，并具有内生定殖能力。请回答下列问题：
（1）苏云金芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌细胞壁的主要成分是 肽聚糖肽聚糖，可选择 溶菌酶溶菌酶（填“纤维素酶和果胶酶”“蛋白酶”或“溶菌酶”）对这两种菌进行去壁处理，从而获得两者的原生质体。
（2）若诱导上述两种菌的原生质体融合的方法与诱导植物细胞原生质体融合的方法相同，则可利用 电融合法、离心法、聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法电融合法、离心法、聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法（答出2种即可）等方法诱导，实现原生质体的融合。
（3）从物理性质来讲，应选用 固体固体培养基对构建的工程菌进行筛选，然后用 液体液体培养基对工程菌进行扩大化培养。
（4）将荧光标记的Taqman探针与待测样本DNA混合，当探针完整时，不产生荧光。在PCR过程中，与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶水解，R与Q分离后，在特定光的激发下R发出荧光（如图1所示，R表示荧光基因，Q表示淬灭基因），随着循环次数的增加，荧光信号强度增加，通过实时检测荧光信号强度，可得Ct值（如图2所示，Ct值表示达到荧光阈值所经历的循环次数）。
依据上述原理，完善如下鉴定工程菌的实验思路：
①分别提取纯化苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和上述工程菌的DNA，作为PCR扩增的 模板模板。
②根据 碱基互补配对碱基互补配对原则，分别设计出能与苏云金芽孢杆菌中的特异性DNA序列结合的Taqman探针A以及能与枯草芽孢杆菌中的特异性DNA序列结合的Taqman探针B．
③将等量的荧光标记的Taqman探针A和Taqman探针B分别加入步骤①三组DNA中进行PCR，并测量Ct值。工程菌组的Ct值应明显 小于小于（填“大于”或“小于”）其余两组。
【答案】肽聚糖；溶菌酶；电融合法、离心法、聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法；固体；液体；模板；碱基互补配对；小于
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/23 12:26:7组卷：8引用：3难度：0.5
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1．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
2．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
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