牛的雄性胚胎中存在特异性的H-Y抗原,可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体,筛选胚胎进行移植,以利用乳腺生物反应器进行生物制药。为研制H-Y单克隆抗体,某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。请回答有关问题:

(1)转基因动物通过分泌的乳汁来生产所需要的药品,称为乳腺生物反应器。将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,通过显微注射的方法,导入哺乳动物的 受精卵受精卵中,然后使其生长发育成转基因动物。
(2)上述实验前必须给小鼠甲注射H-Y抗原,该处理的目的是 诱导小鼠甲产生能够分泌H-Y抗体的B淋巴细胞诱导小鼠甲产生能够分泌H-Y抗体的B淋巴细胞。
(3)实践中常用 聚乙二醇聚乙二醇(化学试剂)作为促融剂,以提高细胞融合的成功率。与植物体细胞杂交相比,动物细胞融合特有的融合方法是 灭活的病毒灭活的病毒。
(4)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤:取小鼠甲脾脏剪碎,用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞,加入培养液制成单细胞悬液取小鼠甲脾脏剪碎,用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞,加入培养液制成单细胞悬液。
(5)研究发现,在小鼠细胞内DNA的合成有两条途径,主要途径(简称D途径)是在细胞内由氨基酸和其他小分子化合物合成核苷酸,进而合成DNA的过程,该过程中叶酸必不可少,氨基蝶呤是叶酸的拮抗剂,可以阻断此途径;另一辅助途径(简称S途径)是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶的催化作用合成DNA,骨髓瘤细胞缺乏催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成的酶。
①图中筛选1利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的 氨基蝶呤氨基蝶呤具有筛选杂交瘤细胞的作用。骨髓瘤细胞及其互相融合细胞不能在HAT培养基上增殖,其原因是 氨基蝶呤可以阻止D途径氨基蝶呤可以阻止D途径。
②图中筛选2的操作包括 克隆化培养克隆化培养和 抗体检测抗体检测,进行多次筛选,筛选所依据的基本原理是 抗体与抗原特异性结合抗体与抗原特异性结合,筛选的目的是 获得能产生专一抗体的杂交瘤细胞获得能产生专一抗体的杂交瘤细胞。
(6)通常选用囊胚期的早期胚胎做雌雄鉴别,鉴别后的 雌性雌性胚胎符合要求,可做胚胎移植。
【答案】受精卵;诱导小鼠甲产生能够分泌H-Y抗体的B淋巴细胞;聚乙二醇;灭活的病毒;取小鼠甲脾脏剪碎,用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞,加入培养液制成单细胞悬液;氨基蝶呤;氨基蝶呤可以阻止D途径;克隆化培养;抗体检测;抗体与抗原特异性结合;获得能产生专一抗体的杂交瘤细胞;雌性
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:16引用:1难度:0.7
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