为获得纯合的转K基因植株，某同学设计了一个实验流程，其主要内容如图所示。
回答下列问题：
（1）天然的目的基因不满足生产需求，研究人员设想通过易错PCR技术引入随机突变，再进行定向筛选，获得满足需求的K基因。易错PCR与普通PCR相似，每次循环也包括变性、退火、延伸延伸三步，但可以通过改变PCR反应条件来提高碱基错配的几率。研究发现Mg2+可以提高已发生错配区域的稳定性，Mn2+可以降低DNA聚合酶对底物的专一性，因此与普通PCR相比，易错PCR反应体系中应适当 AA。
A．提高Mg2+和Mn2+浓度
B．降低Mg2+和Mn2+浓度
C．提高Mg2+降低Mn2+浓度
D．降低Mg2+和提高Mn2+浓度
（2）农杆菌广泛分布在土壤中，若从土壤中分离农杆菌，应取 表层表层（表层/深层）土壤。图中A感染愈伤组织的过程K基因随 T-DNA片段T-DNA片段整合到植物细胞染色体上。
（3）组织培养过程中无菌操作是非常重要的。花粉在培养前需进行消毒处理，不同物种、不同外植体对消毒试剂的反应不同，所以应恰当选择消毒试剂的 种类种类、浓度浓度和处理时间。培养基灭菌后应放置3-5天后使用，目的是使培养器皿内的 水蒸气水蒸气挥发，并观察培养基的 灭菌状态灭菌状态以保证外植体接种在无菌的培养基上。
（4）B过程将愈伤组织浸入高压灭菌的 秋水仙素秋水仙素溶液中处理，再用 无菌水无菌水清洗后，接种于分化培养基上，再生植株。
（5）获得二倍体植株后，若需检测K基因是否存在于植株的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定，在鉴定时应以不同组织细胞中的 核DNA核DNA（填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。若要进一步检测K基因是否正确表达，应检测此植株中K基因的 表达产物表达产物，如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的 性状性状是否得到改变。
【答案】延伸；A；表层；T-DNA片段；种类；浓度；水蒸气；灭菌状态；秋水仙素；无菌水；核DNA；表达产物；性状
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/5 8:0:9组卷：13引用：2难度：0.5
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
