为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。回答下列问题：
（1）酶D基因和转运肽基因所含的三种限制酶（ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ）的切点如图甲所示，现为获得融合基因，研究人员采用PCR法扩增酶D基因，首先要依据基因两端的碱基序列设计引物引物，同时从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，再用ClaⅠClaⅠ和DNA 连接DNA 连接酶处理两个基因后，即可得到AA端与DD端（填图中字母）相连的融合基因。
（2）将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的TDNA中，构建基因表达载体（或重组质粒）基因表达载体（或重组质粒）并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含四环素四环素的培养基上，其目的是得到含融合基因的农杆菌，再利用液体培养基振荡培养，可以得到用于转化的侵染液。
（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞，进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过植物组织培养植物组织培养技术，可培育成转基因油菜植株。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】引物；ClaⅠ；DNA 连接；A；D；基因表达载体（或重组质粒）；四环素；利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞；植物组织培养
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：31引用：4难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
