小白鼠因其具有容易饲养，繁殖率高，遗传上有较高的纯合度，代谢类型、生理病理特征与人类接近，全基因序列和人类高度相似，染色体数与人类非常接近等系列特征而成为人类实验研究的重要对象。据统计，全球每年有超过1亿的小白鼠被用来当作实验样本，它们可以说为人类医学作出了巨大的贡献。如图1是科研人员利用小白鼠单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小鼠的主要技术流程，请分析回答下列问题：
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位点：Amp′是氨苄青霉素抗性基因，Neo′是G418抗性基因。
（1）利用PCR技术可以获取和扩增目的基因。在PCR反应体系中，除含有缓冲液、模板DNA、4种脱氧核苷酸、引物外，还应含有 Taq酶Taq酶；引物应选用图2中的 B和CB和C（填图中字母，字母表示引物）。
（2）已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo′的小鼠细胞。结合图中推测，过程①选用的2种限制酶是 Ⅰ和ⅡⅠ和Ⅱ（填图中的编号），③处的培养液中应添加 G418G418（填“氨苄青霉素”或“G418”）。
（3）图中过程④的本质相当于动物的受精作用。在胚胎工程操作中，常以观察到 两个极体两个极体作为受精的标志。图中的桑葚胚需经 胚胎移植胚胎移植技术才能形成转基因小鼠，若需获得更多遗传性状相同的转基因小鼠，可在该操作前对桑葚胚进行 胚胎分割胚胎分割，该技术所需要的主要仪器设备为 实体显微镜和显微操作仪实体显微镜和显微操作仪。
【答案】Taq酶；B和C；Ⅰ和Ⅱ；G418；两个极体；胚胎移植；胚胎分割；实体显微镜和显微操作仪
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：11引用：3难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
