潮汕生腌海鲜是潮汕等地区一种独特的海鲜做法,通常将濑尿虾洗净切段后用生姜、香菜、蒜、小米椒等配料腌制半小时即可食用。经查阅,生吃海鲜会有感染沙门氏菌等食源性致病菌的风险。回答下列问题:
(1)参照食品检验标准,先将濑尿虾样品接种在亚硫酸铋琼脂(BS)培养基上初筛出疑似菌落。BS培养基中煌绿和亚硫酸钠能抑制或阻止大肠杆菌、变形杆菌和革兰氏阳性菌等的生长,沙门氏菌能正常生长。该培养基属于 选择选择(填“选择”或“鉴别”)培养基,该培养基中添加磷酸氢二钠的作用是 提供无机盐、维持渗透压、pH缓冲物质提供无机盐、维持渗透压、pH缓冲物质。(写出2点即可)
(2)利用沙门氏菌特有的基因进行PCR扩增可以确定疑似菌落是否为沙门氏菌,下表为某同学设计的3对扩增引物,引物在 复性/退火复性/退火阶段与模板结合。分别用这3对引物进行PCR后用凝胶电泳进行检验,其他条件均相同,引物②组的电泳出现图2示结果的原因是 自身存在互补序列,降低了引物与模板结合的有效性,未能扩展出目的基因自身存在互补序列,降低了引物与模板结合的有效性,未能扩展出目的基因。
引物 | 引物序列 | 预测产物/bp |
① | F:5′-GTCACGGTGATCGATCCGGT-3′ R:5′-CACGATATTGATATTAGcCcG-3′ |
852 |
② | F:5′-GAAACGTTCCTTCGGAACGTTTC-3′ R:5′-CTGAACGGTCATCCGTTTCTG-3′ |
894 |
③ | F:5′-CCTGGCACCTCGCGCTATAC-3′ R:5′-CCACACACGGATCGTGGCG-3′ |
826 |
稀释涂布平板
稀释涂布平板
法接种的5组沙门氏菌平板上。若某组平板上 滤纸片周围不长菌落的“抑菌圈”平均直径最大
滤纸片周围不长菌落的“抑菌圈”平均直径最大
,则对应配料的抑制效果最好。【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定;微生物的纯培养.
【答案】选择;提供无机盐、维持渗透压、pH缓冲物质;复性/退火;自身存在互补序列,降低了引物与模板结合的有效性,未能扩展出目的基因;稀释涂布平板;滤纸片周围不长菌落的“抑菌圈”平均直径最大
【解答】
【点评】
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