基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段。如图是基因工程示意图,请据图回答下列问题:

(1)从基因文库中提取的目的基因通过PCR技术进行扩增时,所用的酶与细胞内同类酶的差异在于该酶耐高温耐高温。
(2)进行①过程时,需用限制限制酶切开载体以插入目的基因。若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过表达载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是目的基因无复制原点、目的基因无表达所需启动子目的基因无表达所需的终止子目的基因无复制原点、目的基因无表达所需启动子目的基因无表达所需的终止子(答出两点即可)
(3)若图中宿主细胞为大肠杆菌,一般情况下②过程不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力弱未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力弱;已转化的宿主细胞(大肠杆菌)指的是已导入目的基因并且目的基因能稳定遗传和表达的细胞已导入目的基因并且目的基因能稳定遗传和表达的细胞
(4)真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解,在实验中应选用蛋白酶缺陷型蛋白酶缺陷型的大肠杆菌作为受体细胞,在蛋白质纯化的过程中应添加蛋白酶蛋白酶的抑制剂。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】耐高温;限制;目的基因无复制原点、目的基因无表达所需启动子目的基因无表达所需的终止子;未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力弱;已导入目的基因并且目的基因能稳定遗传和表达的细胞;蛋白酶缺陷型;蛋白酶
【解答】
【点评】
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