如图1是获取用于构建基因表达载体的含人生长激素基因的DNA片段（DNA复制子链延伸方向是5′→3′，转录方向为左→右）示意图，图2是所用质粒示意图，其上的Amp^r表示青霉素抗性基因，Tet^t表示四环素抗性基因。有关限制酶的识别序列和酶切位点如表。请据图回答：

限制酶识别序列和酶切位点表

限制酶	HindⅢ	BamHⅠ	PstⅠ	EcoRⅠ	SmaⅠ	BglⅡ
识别序列（5′→3′）	A↓AGCTT	G↓GATCC	C↓TGCAG	G↓AATTC	CCC↓GGG	A↓GATCT

（1）①过程催化形成磷酸二酯键的酶有

反转录酶和DNA聚合酶

反转录酶和DNA聚合酶

，合成的人生长激素基因中

有

有

（选填“有”或“无”）与终止密码子相应的碱基序列。
（2）引物1由5′→3′的碱基序列为

AGATCTGCATCCTCCAGG

AGATCTGCATCCTCCAGG

，引物2应含有限制酶

BamHⅠ

BamHⅠ

的识别序列；从图1的过程②开始进行PCR扩增，第六次循环结束时，图中用于构建基因表达载体的DNA片段所占比例是

13

16

13

16

。
（3）在构建表达载体的过程中对图中质粒、DNA片段进行合适的完全酶切后，向两者的混合物中加入DNA连接酶，若只考虑DNA切段两两连接，则混合物中将形成

6

6

种环状DNA。
（4）2018年11月基因编辑婴儿事件震惊了世界，舆论一片哗然，某科研团队利用“CRISPR/Cas9”技术将受精卵中的艾滋病病毒受体基因CCR5进行修改，拟培育出具有艾滋病免疫能力的基因编辑婴儿。图3为向导RNA引导Cas9蛋白切割CCR5基因（目标DNA）示意图。
①向导RNA的合成需要

RNA聚合

RNA聚合

酶。Cas9蛋白是一种

限制

限制

酶。
②“GRISPR/Cas9”技术，是利用

显微注射

显微注射

法将Cas9蛋白和特定的引导序列导入受精卵中发挥基因编辑作用。
③基因编辑婴儿引起舆论的关注，很多科学家表示反对，请给出合理的理由

细胞内DNA上可能不止一个Cas9酶识别和切割位点，可能导致脱靶

细胞内DNA上可能不止一个Cas9酶识别和切割位点，可能导致脱靶

。