请回答下列与基因工程和植物克隆有关的问题。
（1）质粒的抗性基因是常用的

筛选

筛选

标记，如果质粒的抗性基因内有若干单一的限制性酶切位点就更好。当外源基因插入这样的酶切位点时，会使该抗性基因失活，这时宿主菌变为对该抗生素

敏感

敏感

的菌株，容易检测出来。
（2）双酶切会使载体和目的基因的DNA都产生两种不同的粘性末端，但DNA连接酶在适宜pH条件下会选择把

相同的粘性末端

相同的粘性末端

连接起来，从而保证目的基因只以一个方向连接入载体。影响DNA连接反应的因素有

温度、酶的用量、反应时间

温度、酶的用量、反应时间

（写出两点）。
（3）花药培养是单倍体克隆的主要方法。花药再生植株的产生有两条途径：一是烟草等植物通过形成花粉胚的

胚胎发生

胚胎发生

途径，二是水稻等植物通过产生芽和根的

器官发生

器官发生

途径，最后发育成单倍体植物。水稻花药培养除了得到单倍体植物，还可以得到来源于花药体细胞的

二倍体

二倍体

植株，因此需要对后代进行进一步的筛选。