绿色荧光蛋白是科学家在水母细胞中发现的由238个氨基酸组成的蛋白质，被广泛应用于分子示踪和生物标记。科研人员利用基因工程获得转基因大肠杆菌，再通过发酵技术生产绿色荧光蛋白。请回答下列问题：
（1）利用PCR从水母基因组中扩增绿色荧光蛋白基因时，需要加入水母基因组DNA、引物、4种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶耐高温的DNA聚合酶缓冲液等物质，其中引物的作用是 使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。
（2）获得转基因大肠杆菌的核心步骤是 基因表达载体的构建基因表达载体的构建，该过程所需要的酶有 限制酶、DNA连接酶限制酶、DNA连接酶。
（3）为提高转化效率，转化前需用 Ca2+Ca2+对大肠杆菌进行处理。
（4）利用转基因大肠杆菌生产绿色荧光蛋白时，培养基应选用 液体培养基液体培养基（填“液体培养基”或“固体培养基”），pH应调至 中性或弱碱性中性或弱碱性。
【考点】基因表达载体的构建；基因工程的操作过程综合．
【答案】耐高温的DNA聚合酶；使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸；基因表达载体的构建；限制酶、DNA连接酶；Ca2+；液体培养基；中性或弱碱性
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：20引用：1难度：0.7
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