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“脑彩虹”是一项最新的大脑成像技术,地过实光蛋白“点亮”大脑肉的神经元,帮助科学家了解大脑。
(1)loxP序列具有方向性,结构如图所示,其中决定方向的序列是
(填序号)。

(2)Cre酶是该技术的关键酶,它能催化如图2所示的反应,即随机识别DNA分子上同向排列的两个相同的loxP序列,并在图1的②中特定位点切断DNA双链,切口被重新连接后,保留片段
2
2
,从而实现目标基因的敲除。若经Cre酶作用使得2个loxP位点间的序列发生反转,其原因可能是
两个loxP序列方向相反
两个loxP序列方向相反

(3)研究者需先用
限制酶和DNA连接
限制酶和DNA连接
酶处理 三种荧光蛋白基因、两种loxP序列,将它们与脑组织特异表达启动子M相连接,构建图3所示的基因表达载体,再用显微注射法将该基因表达载体导入小鼠的
受精卵
受精卵
中,进而得到仅含一个图3所示片段的转基因小鼠,再经过进一步筛选,获得纯合的转基因小鼠a。

(4)图3所示序列的两个loxP1之间或两个loxP2之间的基因,只会被Cre酶识别并切割一次。为使脑组织细胞中Cre酶的表达受调控,研究者将Cre酶基因与启动子N(由信号分子x开启)连接,获得纯合转基因小鼠b,将图4所示纯合小鼠a和b杂交,得到F1
①无信号分子X作用时,F1脑组织和其他组织细胞的颜色分别是
黄色、无色
黄色、无色

②有信号分子X作用时,F1出现“脑彩虹”,请阐述机理:
F1为杂合子,有编码黄色、红色、蓝色荧光蛋白的基因、loxP1、loxP2及Cre酶基因;有信号分子X时,启动Cre酶表达,不同脑细胞中Cre酶表达情况不同,Cre酶识别的loxP不同,因而不同细胞会差异表达黄色、红色或蓝色荧光蛋白基因
F1为杂合子,有编码黄色、红色、蓝色荧光蛋白的基因、loxP1、loxP2及Cre酶基因;有信号分子X时,启动Cre酶表达,不同脑细胞中Cre酶表达情况不同,Cre酶识别的loxP不同,因而不同细胞会差异表达黄色、红色或蓝色荧光蛋白基因

(5)研究者希望具有更丰富的颜色组合,即在一个细胞内随机出现两种或两种以上颜色叠加,形成更多颜色的“脑彩虹”,请依据题目信息,简要写出设计思路:
设法使小鼠脑组织细胞内有多个相同的图3所示DNA片段,Cre酶对每个DNA片段随机剪切,因而细胞的颜色由细胞内多个荧光蛋白的颜色叠加而成
设法使小鼠脑组织细胞内有多个相同的图3所示DNA片段,Cre酶对每个DNA片段随机剪切,因而细胞的颜色由细胞内多个荧光蛋白的颜色叠加而成

【答案】②;2;两个loxP序列方向相反;限制酶和DNA连接;受精卵;黄色、无色;F1为杂合子,有编码黄色、红色、蓝色荧光蛋白的基因、loxP1、loxP2及Cre酶基因;有信号分子X时,启动Cre酶表达,不同脑细胞中Cre酶表达情况不同,Cre酶识别的loxP不同,因而不同细胞会差异表达黄色、红色或蓝色荧光蛋白基因;设法使小鼠脑组织细胞内有多个相同的图3所示DNA片段,Cre酶对每个DNA片段随机剪切,因而细胞的颜色由细胞内多个荧光蛋白的颜色叠加而成
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:30引用:1难度:0.5
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    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
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