噬菌体抗体库技术可以制备单克隆抗体，其方法是将人的抗体基因插入噬菌体载体，以大肠杆菌作为受体细胞进行表达。抗体可能以与外壳蛋白融合表达的形式位于噬菌体表面，也可能以分泌表达的方式胞外排出。回答下列问题：
（1）获取人的抗体基因可从活化的B细胞中提取人的抗体基因的mRNA人的抗体基因的mRNA，经逆转录形成cDNA，再利用PCR技术扩增目的基因。扩增时，反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是将温度加热至90℃～95℃将温度加热至90℃～95℃。
（2）体外重组的质粒可通过Ca2+参与的转化转化方法导入大肠杆菌细胞；而体外重组的噬菌体DNA，理论上可以不利用Ca2+处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，依据是噬菌体可以侵染大肠杆菌，可将重组DNA分子注入大肠杆菌噬菌体可以侵染大肠杆菌，可将重组DNA分子注入大肠杆菌。
（3）真核生物基因（目的基因）在大肠杆菌细胞内表达的蛋白质可能会被降解。为防止抗体被降解，在实验中应选用蛋白酶缺陷型蛋白酶缺陷型的大肠杆菌作为受体细胞。
（4）从噬菌体抗体库中筛选特异性抗体的方法是抗原-抗体杂交技术抗原-抗体杂交技术，其原理是抗原和抗体特异性结合抗原和抗体特异性结合。与利用杂交瘤技术制备单克隆抗体相比，噬菌体抗体库技术省去了动物细胞融合动物细胞融合操作，使制备的流程更简单。
【考点】单克隆抗体及其应用．
【答案】人的抗体基因的mRNA；将温度加热至90℃～95℃；转化；噬菌体可以侵染大肠杆菌，可将重组DNA分子注入大肠杆菌；蛋白酶缺陷型；抗原-抗体杂交技术；抗原和抗体特异性结合；动物细胞融合
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：11引用：1难度：0.6
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3．双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图1是某双特异性抗体作用图。图2是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请分析回答下列问题：
（1）与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是，过程②选用的骨髓瘤细胞（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。
（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行和，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是（答出一点）。
（3）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是。图2方框内需要经过次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
（4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是。发布：2024/12/31 1:30:1组卷：21引用：4难度：0.5
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