科研人员将寒带地区海鱼体内的抗冻基因导入千禧果（一种番茄品种）细胞，成功培育出抗冻千禧果。如图为培育过程中使用的 Ti质粒示意图，其中 Vir区的基因活化能促进T-DNA的加工和转移。回答下列问题：
（1）将抗冻基因的mRNA逆转录后，再进行PCR可获得抗冻基因，该过程中所需要的酶是 逆转录酶、Taq酶逆转录酶、Taq酶。每次PCR循环分为3步。其中所需温度最低的一步的目的是 使引物结合到互补DNA 链上使引物结合到互补DNA 链上。
（2）抗冻基因不能直接导入受体细胞，需要构建抗冻基因表达载体，构建抗冻基因表达载体的目的是 有利于抗冻基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给下一代；有利于抗冻基因在受体细胞中表达和发挥作用有利于抗冻基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给下一代；有利于抗冻基因在受体细胞中表达和发挥作用（答出1点）。
（3）选择图中 Ti质粒构建基因表达载体时，不能选择限制酶Ⅱ切割 Ti质粒。原因是 限制酶Ⅱ会破坏Vir区基因限制酶Ⅱ会破坏Vir区基因。最好选择限制酶 ⅢⅢ构建基因表达载体。
（4）为筛选成功导入抗冻基因的千禧果细胞，最好在培养基中添加 四环素四环素，将成功转化的千禧果细胞诱导培育成植株，最后在 低温（或寒冷）低温（或寒冷）条件下筛选出具有抗冻性状的千禧果植株。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】逆转录酶、Taq酶；使引物结合到互补DNA 链上；有利于抗冻基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给下一代；有利于抗冻基因在受体细胞中表达和发挥作用；限制酶Ⅱ会破坏Vir区基因；Ⅲ；四环素；低温（或寒冷）
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/4 8:0:9组卷：3引用：2难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
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