乳铁蛋白（lactoferrin,LF）是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白，具有广谱抗菌、抗氧化、抗癌、调节免疫系统等强大生物功能，被认为是一种新型抗菌、抗癌药物。如图是研究人员开展人乳铁蛋白（hLF）基因乳腺特异性表达载体构建及转化研究，已知只有将过程①获得的hLF基因置于BLG基因调控区下游，才能使其在动物乳腺的组织中特异性表达。请回答下列问题：
（1）过程①中为了获取大量hLF基因，需要反转录后进行PCR扩增（RT-PCR），PCR时需要在引物的5'5'（填“3'”或“5'”）端添加相应的酶切位点，以便构建pEBL质粒。经过4轮循环后，得到的子代DNA分子中，不同时含有两种引物的DNA分子占1818。
（2）通过过程①获取的hLF基因需要插入到BLG基因之后最可能的原因是BLG基因含有启动子能启动hLF基因在动物乳腺组织中特异性表达BLG基因含有启动子能启动hLF基因在动物乳腺组织中特异性表达。
（3）要在含pEBL质粒、含pEB质粒和不含质粒的山羊乳腺上皮细胞中筛选出含pEBL质粒的山羊乳腺上皮细胞，请写出简要的思路先将被筛选的山羊乳腺上皮细胞置于含新霉素的培养液中培养一段时间，再利用荧光显微镜观察山羊乳腺上皮细胞，没有绿色荧光的活细胞即是含pEBL质粒的山羊乳腺上皮细胞先将被筛选的山羊乳腺上皮细胞置于含新霉素的培养液中培养一段时间，再利用荧光显微镜观察山羊乳腺上皮细胞，没有绿色荧光的活细胞即是含pEBL质粒的山羊乳腺上皮细胞。
（4）要获得转基因山羊，还需要将成功表达hLF的乳腺上皮细胞的细胞核移植到山羊的去核的卵母细胞去核的卵母细胞中，再借助早期胚胎培养和胚胎移植技术孕育出羊羔。胚胎移植程序中要对供、受体母畜进行同期发情处理，目的是使供、受体生殖器官的生理变化相同，为供体的胚胎移植入受体提供相同的生理环境使供、受体生殖器官的生理变化相同，为供体的胚胎移植入受体提供相同的生理环境。
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【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】5'；；BLG基因含有启动子能启动hLF基因在动物乳腺组织中特异性表达；先将被筛选的山羊乳腺上皮细胞置于含新霉素的培养液中培养一段时间，再利用荧光显微镜观察山羊乳腺上皮细胞，没有绿色荧光的活细胞即是含pEBL质粒的山羊乳腺上皮细胞；去核的卵母细胞；使供、受体生殖器官的生理变化相同，为供体的胚胎移植入受体提供相同的生理环境
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【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：9引用：3难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
