启动子可分为组成型启动子和诱导型启动子，35S启动子是组成型启动子，能够持续、高效地启动目的基因在植物各种组织中表达，但往往也会阻碍植物的生长发育，Rd29A启动子是一种逆境诱导型启动子。沙冬青脱水素基因（AmDHN基因）能使植株具有较强的抗旱作用。科研人员构建Rd29A启动子驱动AmDHN基因表达的载体，过程如图1。再利用农杆菌转化法转化“敖汉苜蓿”培育耐旱新品种，以期在干旱地区发展苜蓿产业。neor是新霉素抗性基因，aadA是链霉素抗性基因。请回答下列问题：
| 限制酶 | BclI | SacI | BamHI | PstI | SmaI |
| 识别序列和切割位点 | T↓GATCA | GAGCT↓C | G↓GATCC | CTGCA↓G | CCC↓GGG |
脱氧核苷酸
脱氧核苷酸
。能识别启动子的酶是RNA聚合酶
RNA聚合酶
。（2）如图2是科研人员扩增Rd29A启动子所设计的引物，根据引物的碱基序列及限制酶的识别序列分析，构建载体2时选用的限制酶是
SmaⅠ和SacⅠ
SmaⅠ和SacⅠ
。
（3）构建载体3时，选用
BclⅠ、SacⅠ
BclⅠ、SacⅠ
酶切割载体1、2成功率较高。研究人员在保存目的基因AmDHN时，构建载体4导入大肠杆菌的优点是①②④
①②④
。①稳定保存
②准确复制
③快速表达
④方便取用
（4）载体5需先转入
农杆菌
农杆菌
后再转化苜蓿，转化后应在培养基中添加新霉素
新霉素
筛选转化成功的愈伤组织。（5）为检测转基因苜蓿中AmDHN基因的转录水平，挑选10株转基因植株，利用自来水和20% PEG（模拟干旱条件）处理8h,提取RNA通过RT-PCR 检测 AmDHN基因和 MtActin基因（一种骨架蛋白基因）的表达水平，其结果如图3：
①选择MtActin基因转录水平作为参照的依据是
MtActin基因在各种细胞中表达相对恒定
MtActin基因在各种细胞中表达相对恒定
。②自来水处理和20% PEG条件下的Am DHN基因表达水平的差异说明
干旱能诱导Rd29A启动子启动转录
干旱能诱导Rd29A启动子启动转录
。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】脱氧核苷酸；RNA聚合酶；SmaⅠ和SacⅠ；BclⅠ、SacⅠ；①②④；农杆菌；新霉素；MtActin基因在各种细胞中表达相对恒定；干旱能诱导Rd29A启动子启动转录
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/4/20 14:35:0组卷：45引用：2难度：0.5
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
