人促红细胞生成素（EPO）是一种可用于治疗肾性贫血的糖蛋白类激素，可用乳腺生物反应器生产EPO。科研人员利用大鼠乳清酸蛋白（WAP）基因上游的调控序列及启动子和3′UTR序列构建了基因表达载体。构建前，科研人员扩增了WAP基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入EPO基因中，以确定WAP基因启动子的具体位置。相关信息如图所示。
（1）为将扩增后的产物定向插入到基因表达载体中，以指导EPO基因的表达，需要在引物末端添加特定的限制酶识别序列。由图中信息可知，在P1～P4末端添加的序列所对应的限制酶是 ClaⅠClaⅠ，在A末端添加的序列所对应的限制酶是 MunIMunI。
（2）将通过PCR处理后的含不同长度的WAP基因上游序列与EPO基因连接，构建成表达载体的过程中，需要 44种限制酶切割上述DNA片段。检测转基因雌性大鼠时发现，导入含P1～P3与A扩增产物的个体乳汁中有EPO，而含P4与A扩增产物的个体没有EPO生成。含P4与A扩增产物的个体没有EPO生成的原因是 P4与A扩增产物不含完整的WAP基因的启动子，EPO基因不表达P4与A扩增产物不含完整的WAP基因的启动子，EPO基因不表达。
（3）该实验中，在EPO基因上游插入大鼠WAP基因启动子的理由是 能使EPO基因在大鼠的乳腺细胞中特异性表达能使EPO基因在大鼠的乳腺细胞中特异性表达。
（4）科研人员不选用大肠杆菌作为该实验的受体细胞，从基因表达的角度分析，其原因是 EPO基因是真核生物的基因，该基因转录出的mRNA无法在大肠杆菌细胞内加工成熟，表达出来的产物不是EPOEPO基因是真核生物的基因，该基因转录出的mRNA无法在大肠杆菌细胞内加工成熟，表达出来的产物不是EPO。
【答案】ClaⅠ；MunI；4；P4与A扩增产物不含完整的WAP基因的启动子，EPO基因不表达；能使EPO基因在大鼠的乳腺细胞中特异性表达；EPO基因是真核生物的基因，该基因转录出的mRNA无法在大肠杆菌细胞内加工成熟，表达出来的产物不是EPO
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/3 8:0:9组卷：20引用：2难度：0.5
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
