凝血因子VIII，又名抗血友病球蛋白A，传统方法只能从人血浆中制备。现欲用基因工程等生物工程技术，获得转基因山羊，从其乳汁中分离获得凝血因子VIII。请回答下列问题：
（1）构建的基因表达载体应该包括，目的基因、启动子、终止子、标记基因标记基因等。其中启动子的作用是作为RNA聚合酶识别并结合的部位，启动转录过程作为RNA聚合酶识别并结合的部位，启动转录过程。
（2）扩增凝血因子VIII基因，可使用PCR技术，使用此技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。PCR技术所利用的关键酶是热稳定DNA聚合酶热稳定DNA聚合酶。
（3）目的基因导入绵羊受体细胞，采用最多也是最为有效的方法是显微注射法显微注射法技术。为检测凝血因子VIII基因的表达情况，可提取受体细胞的蛋白质蛋白质，用抗凝血因子VIII的抗体进行杂交实验。
（4）用限制酶A和限制酶B切割质粒和凝血因子VIII基因，在DNA连接酶的作用下可构建重组质粒重组质粒。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】标记基因；作为RNA聚合酶识别并结合的部位，启动转录过程；要有一段已知目的基因的核苷酸序列；热稳定DNA聚合酶；显微注射法；蛋白质；重组质粒
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：1引用：1难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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