由指状青霉引起的绿霉病是柑橘采摘后最具破坏性的病害，使用拮抗微生物是防治柑橘绿霉病的有效手段。科研人员期望从海洋中筛选到产特殊抑菌活性物质的拮抗菌株。请回答下列问题：
（1）在实验室培养微生物时，通常需要对所需的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法有 高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法（答出两种）。
（2）科研人员利用稀释涂布平板法初步从海泥中分离海洋微生物，该方法大致分为三个步骤：①取10g海泥，加入装有90mL 无菌水无菌水的三角瓶中混合均匀，梯度稀释到104倍；②吸取103倍、104倍稀释液涂布在固体培养基固体培养基（填“固体培养基”或“液体培养基”）的表面；③28℃培养至菌落出现。培养过程中可对微生物进行计数，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样做的目的是 防止因培养时间不足而遗漏菌落的数目防止因培养时间不足而遗漏菌落的数目。
（3）挑取单菌落进行划线纯化3次。挑取菌落前，接种环灼烧后需冷却，冷却的目的是 防止温度过高杀死菌种防止温度过高杀死菌种。将纯化的单菌落接种到液体培养基中培养，若要对菌种进行长期保存，可以采用甘油管藏的方法，具体的操作是在3mL的甘油瓶中，装入1mL甘油后灭菌，将1mL菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱中保存在3mL的甘油瓶中，装入1mL甘油后灭菌，将1mL菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱中保存。
（4）将初筛获得的对指状青霉具有拮抗效果的海洋细菌接种于液体培养基中发酵培养，设计实验验证其产生的抑菌活性物质的抑菌效果。实验组中加入适量的发酵上清液，对照组应加入 等量未接种海洋细菌的液体培养基等量未接种海洋细菌的液体培养基，然后两组分别接种等量的指状青霉，一段时间后，观察其生长状况。
【答案】高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法；无菌水；固体培养基；防止因培养时间不足而遗漏菌落的数目；防止温度过高杀死菌种；在3mL的甘油瓶中，装入1mL甘油后灭菌，将1mL菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱中保存；等量未接种海洋细菌的液体培养基
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：8引用：2难度：0.5
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