人体肝脏细胞中的乙醛脱氢酶2（ALDH2）是人体酒精代谢中的关键酶。如图表示利用基因工程生产ALDH2过程中使用的质粒及目的基因的部分结构，β-半乳糖苷酶能分解无色的X-gal产生蓝色物质。图中氨苄青霉素抗性基因、β-半乳糖苷酶基因、目的基因的序列中分别含有1种、5种、2种限制酶的识别序列及切割位点。
（1）构建基因表达载体时一般至少需要两种限制酶，以防止 质粒或目的基因自身环化质粒或目的基因自身环化和 目的基因与质粒反向连接目的基因与质粒反向连接。设计启动子的作用是 使目的基因正常转录（表达）使目的基因正常转录（表达）。
（2）为了使目的基因与载体能正确连接，应在扩增的目的基因A、B两端分别引入 XhoⅠXhoⅠ和 MunⅠMunⅠ两种不同限制酶的识别序列。
（3）MunⅠ酶切后的末端与EcoRⅠ酶切后的末端能连接，原因是 MunⅠ酶与EcoRI酶切后的黏性末端相同（可以互补配对）MunⅠ酶与EcoRI酶切后的黏性末端相同（可以互补配对）。
（4）以大肠杆菌为受体细胞，在筛选插入ALDH2基因成功的受体细胞时，除营养物质外，还要在培养基中加入的物质有 氨苄青霉素和X-gal氨苄青霉素和X-gal。
（5）研究发现如果将ALDH2的第36位的氨基酸替换，可提高其催化效率。请写出通过蛋白质工程技术获取高效ALDH2基因的操作流程：从预期的蛋白质功能（高效ALDH2）出发→设计预期的蛋白质结构（高效ALDH2结构）→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列从预期的蛋白质功能（高效ALDH2）出发→设计预期的蛋白质结构（高效ALDH2结构）→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】质粒或目的基因自身环化；目的基因与质粒反向连接；使目的基因正常转录（表达）；XhoⅠ；MunⅠ；MunⅠ酶与EcoRI酶切后的黏性末端相同（可以互补配对）；氨苄青霉素和X-gal；从预期的蛋白质功能（高效ALDH2）出发→设计预期的蛋白质结构（高效ALDH2结构）→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列
【解答】
【点评】
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发布：2024/12/7 0:0:1组卷：11引用：2难度：0.5
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
