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新冠病毒是一种单链RNA病毒,常用“荧光RT-PCR技术”进行检测,方法是取检测者的mRNA逆转录出cDNA,并大量扩增,时,用荧光标记的新冠病毒核酸探针来检测PCR产物中是否含有新冠病毒的cDNA.请回答下列问题:
(1)“荧光RT-PCR技术”所用的试剂盒中通常都应该含有:
逆转录酶
逆转录酶
热稳定性DNA聚合酶(Taq酶)
热稳定性DNA聚合酶(Taq酶)
、荧光标记的核酸探针、引物、dNTP、缓冲体系。
(2)如果要同时扩增两种基因,则试剂盒中的引物应该有
4
4
种。如图1为新冠病毒的“ORFlab基因”对应的cDNA片段结构示意图,则与之对应的引物结合的部位应该是图中的
4、1
4、1
(子链延伸方向为其自身的5′→3′,用图中数字作答)。若已知该基因的引物Ⅰ,能否依据其碱基序列设计出另一种引物Ⅱ?
不能
不能
,理由是
两段引物的碱基序列没有相关性(既不相同,也不互补)
两段引物的碱基序列没有相关性(既不相同,也不互补)


(3)在检测过程中,随着PCR的进行,反应产物不断累积,“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加。可通过荧光强度的变化监测产物量的变化从而得到一条荧光扩增曲线图(如图2)。

①“平台期”出现的最可能的原因是
试剂盒中的原料、引物和探针数量一定,超出一定的循环数后,荧光标记的“杂交双链”不再增加
试剂盒中的原料、引物和探针数量一定,超出一定的循环数后,荧光标记的“杂交双链”不再增加

②理论上,在检测过程中,有荧光标记的“杂交双链”出现,则说明检测结果呈
(填“阴”或“阳”)性,但为了保证检测结果的准确性,一般要达到或超过阈值时才确诊。现有两个待检样本,检测时都出现了上述形态的曲线,但甲的a点比乙的a点明显左移。请给这种结果做出科学合理的解释(试剂盒合格且正常,操作过程规范且准确):
甲样本中的新冠病毒含量更高达到阈值所需的循环数更少
甲样本中的新冠病毒含量更高达到阈值所需的循环数更少

【答案】逆转录酶;热稳定性DNA聚合酶(Taq酶);4;4、1;不能;两段引物的碱基序列没有相关性(既不相同,也不互补);试剂盒中的原料、引物和探针数量一定,超出一定的循环数后,荧光标记的“杂交双链”不再增加;阳;甲样本中的新冠病毒含量更高达到阈值所需的循环数更少
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:54引用:3难度:0.7
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  • 1.数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术,其原理如图所示。下列有关叙述正确的是(  )

    发布:2024/12/30 23:30:2组卷:7引用:2难度:0.6
  • 2.科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力,利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因,从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题:
    (1)PCR定点突变技术属于
     
    (填“基因工程”或“蛋白质工程”)。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体,常用
     
    将基因表达载体导入植物细胞,还需用到植物细胞工程中的
     
    技术,才能最终获得转基因植物。
    (2)PCR过程所依据的原理是
     
    。利用PCR技术扩增,若将一个目的基因复制10次,则需要在缓冲液中至少加入
     
    个引物。
    (3)目的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为
     
    。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大,可能的原因是
     

    (4)另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中,经培育获得一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是
     

    A.选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
    B.采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
    C.人的生长激素基因能在小鼠细胞表达,说明遗传密码在不同种生物中可以通用
    D.将转基因小鼠体细胞进行核移植(克隆),可以获得多个具有外源基因的后代

    发布:2025/1/16 8:0:1组卷:14引用:2难度:0.6
  • 3.下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是(  )

    发布:2024/12/30 23:30:2组卷:4引用:3难度:0.7
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