遗传毒性物质常存在于被化学物质污染的水体中，可损伤生物的DNA，严重威胁人类健康。研究人员通过基因工程改造大肠杆菌，筛选出对遗传毒性物质反应灵敏的工程菌株，用于水质检测。
（1）已知图1质粒中SRR基因表达产物可使大肠杆菌裂解。将“毒性响应启动子”插入图1所示质粒的P区，获得基因工程改造的大肠杆菌，改造后的大肠杆菌在遇到遗传毒性物质时，会发生裂解，据此可以推测“毒性响应启动子”作用是

在遗传毒性物质存在时，作为RNA聚合酶识别和结合部位，驱动基因（SRR基因）转录

在遗传毒性物质存在时，作为RNA聚合酶识别和结合部位，驱动基因（SRR基因）转录

。
（2）研究人员选取毒性响应启动子sul与图1质粒连接。图2显示了毒性响应启动子sul内部存在的酶切位点。
①据图1、图2信息，克隆启动子sul时，在其A端和B端应分别添加限制酶XhoI和SapI的识别序列，作用是

（两侧添加限制性内酶XhoⅠ和SapⅠ的识别序列后）即可用限制酶XhoⅠ和SapⅠ切割sul的克隆产物，以获取到完整的sul启动子（目的基因），同时质粒上也存在这两个酶切位点，酶切后能保证启动子sul与质粒的正确连接

（两侧添加限制性内酶XhoⅠ和SapⅠ的识别序列后）即可用限制酶XhoⅠ和SapⅠ切割sul的克隆产物，以获取到完整的sul启动子（目的基因），同时质粒上也存在这两个酶切位点，酶切后能保证启动子sul与质粒的正确连接

。
②将重组后的表达载体导入大肠杆菌，置于含有

氨苄青霉素

氨苄青霉素

的选择培养基中进行筛选、鉴定及扩大培养，最终获得工程菌sul。
（3）研究人员继续从其它菌中克隆出两种毒性响应启动子（imu、rec），用同样的方法获得工程菌，检测不同处理下菌体密度相对值，以筛选最灵敏的检测菌株。

表1					表2
相对值 时间（h）	对照	sul	imu	rec	对照	sul	imu	rec

①将3种工程菌和对照菌在LB培养基中培养一段时间后，表1检测结果显示

3种工程菌菌体数量增长趋势与对照菌基本一致

3种工程菌菌体数量增长趋势与对照菌基本一致

，说明工程菌在自然生长状态下不会产生自裂解现象。
②上述菌株在LB培养基中生长2h时后加入遗传毒性物质，每隔一段时间进行检测菌体密度相对值，结果如表2。据表可知，3种工程菌均启动了对遗传毒性物质的响应，应选择工程菌

转入rec启动子的菌株

转入rec启动子的菌株

作为最优检测菌株，依据是

（加入有毒物质后）其中转入rec启动子的菌株在不同培养时长下菌体密度值都最低

（加入有毒物质后）其中转入rec启动子的菌株在不同培养时长下菌体密度值都最低

。