CRISPR/Cas9基因编辑技术可以按照人们的意愿精准剪切、改变任意靶基因的遗传信息,对该研究有突出贡献的科学家被授予2020年诺贝尔化学奖。我国科学家领衔的团队利用CRISPR/Cas9等技术,将人的亨廷顿舞蹈病致病基因(HTT基因)第1外显子(其中含150个CAG三核苷酸重复序列)“敲入”猪基因组内,获得了人-猪“镶嵌”HTT基因,利用胚胎工程技术成功地构建了亨廷顿舞蹈病的动物模型。回答下列问题:
(1)PCR技术是获得人HTT基因常用的方法,制备PCR反应体系时,向缓冲溶液中分别加入人HTT基因模板、4种脱氧核糖核苷酸及引物和Taq酶引物和Taq酶等,最后补足H2O。
(2)CRISPR/Cas9基因编辑技术中,SgRNA是根据靶基因设计的引导RNA,准确引导Cas9切割与SgRNA配对的靶基因DNA序列,由此可见,Cas9在功能上属于限制性核酸内切限制性核酸内切酶。与CRISPR/Cas9相比,限制酶的特性决定了其具有作用对象单一作用对象单一的局限性。
(3)在实验过程中,为确认实验猪细胞基因组内是否含有人-猪“镶嵌”HTT基因,常用的检测手段包括PCR技术及基因探针技术基因探针技术。
(4)含有“敲入”序列的猪胚胎成纤维细胞在体外培养时通过细胞分裂,数量不断增加,当细胞贴壁生长到表面相互接触时,细胞停止分裂增殖,这种现象称为接触抑制接触抑制。贴满瓶壁的细胞常用胰蛋白酶胰蛋白酶进行消化处理,以便进行传代培养。
(5)将含有“敲入”序列的猪胚胎成纤维细胞的细胞核导入去核的卵母细胞的过程称为核移植核移植。此后进行体外胚胎培养并移植到代孕母猪体内,最终获得亨廷顿舞蹈病动物模型。
【答案】引物和Taq酶;限制性核酸内切;作用对象单一;基因探针技术;接触抑制;胰蛋白酶;核移植
【解答】
【点评】
声明:本试题解析著作权属菁优网所有,未经书面同意,不得复制发布。
发布:2024/4/20 14:35:0组卷:55引用:6难度:0.6
相似题
-
1.数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术,其原理如图所示。下列有关叙述正确的是( )
发布:2024/12/30 23:30:2组卷:7引用:2难度:0.6 -
2.科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力,利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因,从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题:
(1)PCR定点突变技术属于
(2)PCR过程所依据的原理是
(3)目的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为
(4)另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中,经培育获得一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是
A.选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B.采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C.人的生长激素基因能在小鼠细胞表达,说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D.将转基因小鼠体细胞进行核移植(克隆),可以获得多个具有外源基因的后代发布:2025/1/16 8:0:1组卷:14引用:2难度:0.6 -
3.下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是( )
发布:2024/12/30 23:30:2组卷:3引用:3难度:0.7
相关试卷