干旱，盐碱和冻害是限制植物生长发育的主要逆境因子，胚胎晚期丰富蛋白（LEA）是一类重要的植物细胞脱水保护蛋白，在抵御干旱等非生物胁迫过程中发挥着保护功能。科研工作者将拟南芥的LEA基因转入小麦体内培育转基因耐盐品系小麦，以提高小麦的抗盐碱性。回答下列问题：
（1）为获取LEA基因，可以从拟南芥细胞中提取总RNA，经过逆转录过程得到 cDNAcDNA，再利用 PCRPCR技术进行大量扩增。
（2）在体外人工扩增LEA基因的过程中，要控制反应体系的温度变化。加热至90～95℃的目的是 使DNA片段受热变性解链为单链使DNA片段受热变性解链为单链；随后冷却至55～60℃，再加热至70～75℃的目的是 进行互补链的合成进行互补链的合成。
（3）构建基因表达载体是基因工程的核心，操作过程中用到的有关酶是 限制酶和DNA连接酶限制酶和DNA连接酶。常用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞，转基因植物的基因组中含有目的基因片段，原因是 农杆菌Ti质粒上的T-DNA携带目的基因并将其转移到受体细胞染色体的DNA上农杆菌Ti质粒上的T-DNA携带目的基因并将其转移到受体细胞染色体的DNA上。
（4）为检测转基因小麦是否表达出了LEA，常用 抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交法进行检测。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】cDNA；PCR；使DNA片段受热变性解链为单链；进行互补链的合成；限制酶和DNA连接酶；农杆菌Ti质粒上的T-DNA携带目的基因并将其转移到受体细胞染色体的DNA上；抗原-抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：4引用：3难度：0.5
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
