乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的危害奶牛养殖业的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽（抗细菌）和人干扰素（抗病毒）基因的双转基因奶牛新品种。图1为基因表达载体，图2为培育流程。

（1）培育双转基因奶牛涉及的生物技术有

基因工程、动物细胞培养、核移植、胚胎移植

基因工程、动物细胞培养、核移植、胚胎移植

（至少2项）。
（2）牛乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建表达载体时

启动子

启动子

的选择有关。据图可知，干扰素基因与

新霉素抗性

新霉素抗性

基因可同时转录，基因工程过程中主要的工具酶有

限制酶、DNA连接酶

限制酶、DNA连接酶

。
（3）将基因导入牛胎儿成纤维细胞前，需用

胰蛋白酶

胰蛋白酶

将其处理成单个细胞。成纤维细胞无法直接发育成个体，需要去核卵母细胞的细胞质诱导，以实现细胞核的

全能性

全能性

。
（4）研究者利用

抗原-抗体杂交

抗原-抗体杂交

技术筛选出

干扰素

干扰素

（填“牛乳铁蛋白肽”或“干扰素”）基因成功表达的胚胎进行移植。