甜玉米与普通玉米相比，甜玉米中可溶性糖向淀粉的转化较慢，含可溶性糖量高，汁多质脆，富含多种维生素。为了使甜玉米更富有生产应用价值，科研人员通过转基因技术培育出了超量表达P蛋白转基因甜玉米。在超量表达P基因载体的构建中，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图所示。
说明：强启动子是一段有特殊结构的DNA片段；BamHⅠ、HindⅢ、EcoRⅠ、NotⅠ、SacⅠ代表不同的限制酶；T-DNA是农杆菌的Ti质粒上的DNA片段。
（1）为了特异性扩增P基因序列，可采用 PCRPCR的方法，一般要加入的原料为 dNTPdNTP。
（2）强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被 RNA聚合酶RNA聚合酶识别并结合，驱动基因的持续转录。
（3）构建能超量表达P基因的载体，需选用 BamHⅠ和SacⅠBamHⅠ和SacⅠ限制酶的组合和DNA连接酶。将重组Ti质粒转入农杆菌，需先将农杆菌用 CaCl2溶液CaCl2溶液处理。
（4）将玉米愈伤组织经农杆菌液浸泡，超量表达P基因会随T-DNA 整合到玉米细胞的染色体DNA上整合到玉米细胞的染色体DNA上，从而获得转基因植物细胞。继而进行植物组织培养，培养基中需加入 潮霉素潮霉素进行筛选，筛选出的愈伤组织经 再分化再分化过程形成丛芽，然后在 生长素生长素（填激素名称）较多的培养基上形成根，最终获得多个玉米株系。发现某株系的P蛋白表达量较低，请对该现象作出合理的解释：该株系玉米中可能没有导入目的基因或目的基因未表达该株系玉米中可能没有导入目的基因或目的基因未表达。
【考点】基因工程的操作过程综合；植物的组织培养．
【答案】PCR；dNTP；RNA聚合酶；BamHⅠ和SacⅠ；CaCl2溶液；整合到玉米细胞的染色体DNA上；潮霉素；再分化；生长素；该株系玉米中可能没有导入目的基因或目的基因未表达
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：11引用：2难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
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