科研团队利用转基因技术等培育了营养器官富含淀粉的新型烟草，可专用于燃料乙醇的生产。回答下列问题。
（1）首先提取烟草总RNA，通过逆转录过程合成cDNA，以cDNA为模板 PCRPCR进行扩增，克隆出控制淀粉生物合成的ADP葡萄糖焦磷酸化酶小亚基基因NtSSU。
（2）目的基因NtSSU.和载体pCAMBIAI303上均有识别序列不同的限制酶为KpnⅠ和XbaⅠ的酶切位点。构建基因表达载体的简要过程是 使用两种限制酶处理目的基因 NtSSU和载体 pCAMBIA1303，随后使用DNA连接酶将载体和目的基因连接起来使用两种限制酶处理目的基因 NtSSU和载体 pCAMBIA1303，随后使用DNA连接酶将载体和目的基因连接起来。
（3）用 Ca2+Ca2+处理农杆菌，可使重组DNA更容易转入农杆菌。然后将得到的转基因农杆菌与烟草叶片共同培养，诱导产生 愈伤组织愈伤组织进一步分化形成胚状体，培养再生成植株。
（4）目的基因NtSSU整合到受体细胞基因组上，最终能否翻译出目的蛋白质至关重要，因此需要进行蛋白质的检测，从受体细胞中提取 蛋白质蛋白质后，进行电泳分离，然后利用相应的 抗体抗体进行检测。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】PCR；使用两种限制酶处理目的基因 NtSSU和载体 pCAMBIA1303，随后使用DNA连接酶将载体和目的基因连接起来；Ca2+；愈伤组织；蛋白质；抗体
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：13引用：2难度：0.5
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
