厌氧微生物在自然界中分布广泛,种类繁多,作用也日益引起重视。由于它们不能代谢氧来进一步生长,且多数情况下氧气分子的存在对其有害,所以在进行分离、培养时必须处于去除氧的环境下。分离和培养厌氧菌的方法很多,碱性焦性没食子酸法是操作比较简单的方法之一。焦性没食子酸与碱溶液NaOH作用后形成易被氧化的碱性没食子盐,它能通过氧化作用除掉密封容器中的氧气。
菌种:巴氏芽孢梭菌(一种厌氧菌)、荧光假单胞菌。
培养基:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、葡萄糖牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。
溶液或试剂:焦性没食子酸、10%NaOH溶液,灭菌的石蜡凡士林等。
仪器或其他用具:灭菌脱脂棉、灭菌的培养皿和培养皿盖等。
请完成下列实验步骤及相关问题:
(1)用灭菌完成的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基进行 倒平板倒平板(填操作步骤),待培养基凝固稍干燥后,在平板上最好采用 平板划线平板划线法一半接种巴氏芽孢梭菌,另一半接种荧光假单胞菌,并在皿底用记号笔作好标记。
(2)滴加10%NaOH溶液约2mL于焦性没食子酸上,切勿使溶液溢出脱脂棉,立即将 已接种的平板已接种的平板覆盖于培养皿盖上,必须将脱脂棉全部罩住,目的是既可以使碱性没食子盐充分去除氧气,又防止 培养皿和皿盖出现较大缝隙导致氧气和杂菌进入培养皿和皿盖出现较大缝隙导致氧气和杂菌进入,除此之外,焦性没食子酸反应物不能与培养基表面接触。最后,以溶化的石蜡凡士林液密封培养皿与皿盖的接触处,置30℃培养,定期观察平板上菌种的生长状况并记录。
(3)在进行厌氧培养时,同时接种荧光假单胞菌,它是一种 好氧好氧菌,目的是监测容器内的氧气环境。
(4)各种厌氧微生物对氧的耐受能力有所不同。以下是采用深层琼脂法(培养基不同深度含氧量不同)探究某种厌氧菌的耐氧能力实验:
用无菌生理盐水,制成菌悬液。将装有葡萄糖牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的试管置于100℃水浴中溶化并保温5~10min。将试管取出后,室温静置冷却至45~50℃时,无菌操作吸取0.1mL细菌悬液加入试管中,双手快速搓动试管(如图),目的是 使菌种均匀分布于培养基中使菌种均匀分布于培养基中,不采用震荡是避免达到目的的同时有过多的空气混入培养基。之后将试管置于冰浴中,使培养基迅速凝固。将上述试管置于28℃温室中静置保温48h后开始连续进行观察,直至结果清晰为止,根据 细菌在试管中的生长部位细菌在试管中的生长部位来判断细菌的耐氧能力大小。
【答案】倒平板;平板划线;已接种的平板;培养皿和皿盖出现较大缝隙导致氧气和杂菌进入;好氧;使菌种均匀分布于培养基中;细菌在试管中的生长部位
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:13引用:1难度:0.7
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(1)为获得单菌落,可采用平板划线法或
A.细胞膜 B.核糖体 C.拟核 D.荚膜
(2)表中培养液pH均为6.0,若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定,则应选用表中的
①缺少
②具有
③缺乏
表 试验用培养液配方培养液 阿拉伯胶 阿拉伯胶酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4•7H2O KCl FeSO4•7H2O
A
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g/L
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g/Lg/L B
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g/L发布:2025/1/2 8:0:1组卷:6引用:1难度:0.5 -
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