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自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题。
（1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用
尿素作为唯一的氮源
尿素作为唯一的氮源
的培养基进行分离，这种培养基属于
选择培养基
选择培养基
培养基（按功能分类）。可在培养基中加入
酚红
酚红
指示剂对该类微生物鉴别。
（2）若取土样6g,应加入
54
54
mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成10¹～10⁷不同浓度的土壤溶液。将10³～10⁷倍的稀释液分别吸取0.2mL加入到固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板，这种接种方法称为
稀释涂布平板法
稀释涂布平板法
。将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h,观察并统计菌落数，结果如表，其中
10⁵
10⁵
倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为
1.32×10⁸
1.32×10⁸
。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目
低
低
（低/高）。

稀释倍数 10³ 10⁴ 10⁵ 10⁶ 10⁷

菌落数
（个） 1号平板 478 367 277 26 5

2号平板 496 354 261 20 8

3号平板 509 332 254 29 3

（3）若研究尿素分解菌的群体生长规律，可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是
将聚集的菌体逐步稀释以便获得（不连续）单个菌落
将聚集的菌体逐步稀释以便获得（不连续）单个菌落
。将分离纯化后的单个菌落进行液体培养，可采用定期取样的方法进行计数。若以一个大方格（体积为0.1mm³）有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为45，菌液稀释倍数为10²，那么原菌液的菌群密度为
2.25×10⁸
2.25×10⁸
个/mL。

【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）．

【答案】尿素作为唯一的氮源；选择培养基；酚红；54；稀释涂布平板法；10⁵；1.32×10⁸；低；将聚集的菌体逐步稀释以便获得（不连续）单个菌落；2.25×10⁸

【解答】

【点评】

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发布：2024/12/31 3:30:1组卷：54引用：4难度：0.6

相似题

1．丙草胺（C₁₅H₂₂ClNO₂）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列叙述错误的是（　　）

A．培养细菌时，一般需要将培养基调至酸性

B．利用该方法计数结果往往比显微镜直接计数法偏小

C．以丙草胺为唯一氮源培养基进行培养可提高降解菌的浓度

D．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×10⁹个

发布：2024/12/31 4:0:1组卷：17引用：3难度：0.7

解析

2．回答下列关于微生物的问题．
阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01，以下为该菌株的鉴定过程．
（1）为获得单菌落，可采用平板划线法或

法将初筛菌液接种在

培养基上．46SM01菌落为粉白色，初期呈突起絮状，在显微镜下观察到，菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1μm,初步推测为真菌，则其特征中，最能说明SM01是真菌的是有细胞核，且有分生孢子．SM01还一定具有的结构有（多选）

．
A．细胞膜 B．核糖体 C．拟核 D．荚膜
（2）表中培养液pH均为6.0，若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的

培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：
①缺少

，SM01不能很好生长
②具有

，会影响对SM01自身产生的酶活力的测定结果
③缺乏

，会影响SM01的生长，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定．
表试验用培养液配方

培养液阿拉伯胶阿拉伯胶酶 NaNO₃ 牛肉膏 K₂SOPO₄ MgSO₄•7H₂O KCl FeSO₄•7H₂O

A
25g/L
g/L
g/L
g/L g/L

B
25g/L
g/L
g/L
g/L
g/L
g/L
g/L

C
g/L
g/L
g/L
g/L
g/L

D
25g/L
g/L __
g/L
g/L
g/L
g/L

发布：2025/1/2 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.5

解析

3．为了防治大气污染，烟气脱硫是环保领域迫切需要解决的问题．研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，并了解其生长规律，进行了如下操作．请回答下列问题：
（1）采样与细菌的筛选：在某热电厂烟囱周围区域要尽量做到

采集土样．为确保能够从样品中分离到所需要的烟气脱硫细菌，可以通过

增加脱硫菌的浓度．
（2）驯化脱硫细菌：将筛选出的脱硫细菌接种于有少量无菌水的三角瓶中，边搅拌边持续通入SO₂气体几分钟，然后接种到培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通SO₂的时间，同时逐步降低培养基的pH．此操作的目的是分离出

的脱硫细菌．
（3）培养与观察：一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），驯化后的脱硫细菌表现出稳定的

特征．用高倍显微镜

（填“可以”或“不可以”）观察到脱硫细菌的核糖体．
（4）探究生长规律：在计数时，计数方法有稀释涂布平板法和

直接计数法．在用稀释涂布平板法进行计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的

；通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，通常推测统计的菌落数往往比活菌的实际数目

．
发布：2025/1/1 8:0:2组卷：6引用：2难度：0.5
解析

稀释倍数		10³	10⁴	10⁵	10⁶	10⁷
菌落数（个）	1号平板	478	367	277	26	5
	2号平板	496	354	261	20	8
	3号平板	509	332	254	29	3

培养液	阿拉伯胶	阿拉伯胶酶	NaNO₃	牛肉膏	K₂SOPO₄	MgSO₄•7H₂O	KCl	FeSO₄•7H₂O
A	25g/L	__	__	__	g/L	g/L	g/L	g/L
B	25g/L	g/L	__	g/L	g/L	g/L	g/L	g/L
C	__	__	g/L	__	g/L	g/L	g/L	g/L
D	25g/L	__	g/L	__	g/L	g/L	g/L	g/L