胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只能依靠从猪、牛等动物的胰腺中提取,100kg胰腺只能提取4~5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。如图为利用基因工程生产胰岛素流程图,请回答下列问题:
(1)目的基因克隆酶切过程和质粒提取、酶切过程都需要一种工具是限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶,为确保质粒与克隆基因能正确连接,需要用能获得相同黏性末端的限制酶处理质粒和目的基因(或用两种不同的限制酶处理质粒和目的基因)用能获得相同黏性末端的限制酶处理质粒和目的基因(或用两种不同的限制酶处理质粒和目的基因)。
(2)基因工程生产胰岛素转化的宿主细胞通常是大肠杆菌,这是因为大肠杆菌线繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少(生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产)繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少(生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产),大肠杆菌细胞最常用的转化方法是:首先用钙离子钙离子处理,使细胞处于感受感受态,再将重组表达载体DNA分子重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与之混合,完成转化过程。
(3)诱导表达过程中,首先用分子杂交分子杂交技术检查是否形成了mRNAmRNA,其次要检测是否合成了胰岛素胰岛素,所用的方法为抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交。
(4)从大肠杆菌体内获得的蛋白质必须经过分离纯化,这是因为大肠杆菌体内不只是合成胰岛素一种蛋白质大肠杆菌体内不只是合成胰岛素一种蛋白质。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】限制性核酸内切酶;用能获得相同黏性末端的限制酶处理质粒和目的基因(或用两种不同的限制酶处理质粒和目的基因);繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少(生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产);钙离子;感受;重组表达载体DNA分子;分子杂交;mRNA;胰岛素;抗原-抗体杂交;大肠杆菌体内不只是合成胰岛素一种蛋白质
【解答】
【点评】
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