病菌感染首蓓,对首蓓的产量和品质有很多的影响,研究人员将溶菌酶基因(LYZ基因)和绿色荧光蛋白基因(GFP基因)连接为LYZ一GFP基因,利用农杆菌转化法将其导入到苜蓿中。本实验中使用图1所示质粒构建载体,Vir区的基因产物是T一DNA整合到植物基因组中的必备条件,图2表示含有LYZ一GFP基因的DNA片段。图中箭头表示相应限制酶的酶切位点,酶级形成的末端均为私性末端,据图回答问题:

(1)用PCR法对图2所示基因片段进行扩增,并将产物用限制酶Ⅰ进行切割,质粒用同样的限制酶切割,用DNA连接酶进行连接。只考虑两段不同DNA片段相连(不考虑自身的连接)的情况所得到的环状DNA分子有 22种。
(2)本实验中的目的基因是 溶菌酶基因(或LYZ基因)溶菌酶基因(或LYZ基因),最佳的限制酶的选择是 限制酶I、限制酶Ⅲ限制酶I、限制酶Ⅲ。在鉴别首蓓细胞中是否含有目的基因的时候,研究者可选择的标记基因有 卡那霉素抗性基因和绿色荧光蛋卡那霉素抗性基因和绿色荧光蛋。
(3)目的基因在体外扩增时,与体内复制的区别在于 体外扩增过程不霱要解旋酶体外扩增过程不霱要解旋酶。
(4)目的基因的表达产物在植物体中发挥作用时 不具有不具有(填“具有”或“不具有”)特异性。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】2;溶菌酶基因(或LYZ基因);限制酶I、限制酶Ⅲ;卡那霉素抗性基因和绿色荧光蛋;体外扩增过程不霱要解旋酶;不具有
【解答】
【点评】
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