如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图，所用载体为质粒A．已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因能得到表达，根据图示所给信息回答下列问题：
（1）将目的基因和质粒结合形成重组质粒时，用同一种限制性内切酶分别切割目的基因和质粒，露出相同的黏性末端，将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的DNA连接酶DNA连接酶，使质粒与目的基因结合成重组质粒。
（2）目前把重组质粒导入细菌细胞时，效率还不高；导入完成后得到的细菌，实际上有的根本没有导入质粒；有的导入的是普通质粒A；只有少数导入的是重组质粒。此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒：
将得到的细菌涂抹在一个含有氨苄青霉素氨苄青霉素的培养基上，能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的，反之则没有。此过程中体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件具有标记基因具有标记基因、能在宿主细胞内复制并稳定的保存能在宿主细胞内复制并稳定的保存。
（3）若进一步鉴定证明细菌中导入的是普通质粒A还是重组质粒，将得到的细菌涂抹在一个含有四环素四环素的培养基上培养，若细菌能生长能生长，则导入的是普通质粒。如果利用DNA分子杂交原理来证明此过程，应该用放射性同位素（或荧光分子）标记的生长激素基因放射性同位素（或荧光分子）标记的生长激素基因作为探针。
（4）使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞细菌或病毒侵染细胞的途径。
（5）目的基因表达成功后，“工程菌”明显不同于细菌D．从变异的来源看，此变异属于基因重组基因重组。导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是受体细胞通过转录和翻译过程合成出相应的蛋白质（生长激素）受体细胞通过转录和翻译过程合成出相应的蛋白质（生长激素）。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】DNA连接酶；氨苄青霉素；具有标记基因；能在宿主细胞内复制并稳定的保存；四环素；能生长；放射性同位素（或荧光分子）标记的生长激素基因；细菌或病毒侵染细胞；基因重组；受体细胞通过转录和翻译过程合成出相应的蛋白质（生长激素）
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：7引用：1难度：0.6
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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