人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药，但是心梗患者注射大剂量的t-PA会诱发颅内出血。研究证实，将t-PA蛋白第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。据此，先对天然的t-PA基因进行序列改造，然后再采取传统的基因工程方法表达该改造后的基因，可制造出性能优异的改良t-PA蛋白。（注：如图表示相关的目的基因载体及限制酶，PCLY11为质粒，新霉素为抗生素）。请回答下列问题：
（1）以上制造出性能优异的改良t-PA蛋白的过程被称为 蛋白质蛋白质工程。已知t-PA基因序列已测出，且第84位半胱氨酸的模板链碱基序列为ACA，而丝氨酸的模板链碱基序列为AGA，因此要获得改造后的目的基因最好采用 化学合成化学合成法获得。若t-PA基因可从cDNA文库中获取，cDNA文库中的基因 不含不含（填“含有”或“不含”）内含子序列。
（2）若用PCR技术扩增改良后的t-PA基因，需要在PCR扩增仪中加入 22种引物，其作用是 使DNA聚合酶从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸使DNA聚合酶从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。在t-PA改良基因与质粒pCLY11构建基因表达载体时，需要用限制酶 BglⅡ和XmaⅠBglⅡ和XmaⅠ切割。
（3）以大肠杆菌作为受体细胞，在含新霉素的培养基中形成菌落的受体细胞并非都是目的菌株，原因是 导入未连目的基因的质粒的大肠杆菌也能在这种培养基上生长导入未连目的基因的质粒的大肠杆菌也能在这种培养基上生长，这时需选择呈 白白色的菌落，进一步培养检测和鉴定，以选育出能生产改良t-PA蛋白的工程菌株。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】蛋白质；化学合成；不含；2；使DNA聚合酶从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸；BglⅡ和XmaⅠ；导入未连目的基因的质粒的大肠杆菌也能在这种培养基上生长；白
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：36引用：1难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
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