科研工作者将TaNHX2基因转移到某植物细胞内，获得了转基因耐盐植株新品种。如图是获取的含有目的基因的DNA片段，Sau3AI、EcoRI、BamHI三种限制性核酸内切酶的识别序列分别是↓GATC，G↓AATTC，G↓GATCC，质粒上各有一个Sau3AI和EcoRI的酶切位点。请分析并回答下列问题：
（1）若用BamHI切割图中所示的DNA片段获得了目的基因，则选用限制酶Sau3AISau3AI切割质粒，以便构建重组质粒，该方案的缺陷是会出现目的基因和质粒的自我环化以及目的基因在质粒上的连接方向不确定目的基因在质粒上的连接方向不确定。故切割图中所示的DNA片段的最佳方案是选用限制酶EcoRI和BamHIEcoRI和BamHI。
（2）实验中酶作用的强弱可用酶活性来表示，通常，酶活性的高低可用单位时间内单位体积中反应物的消耗量或产物的增加量单位时间内单位体积中反应物的消耗量或产物的增加量来表示。
（3）若采用农杆菌转化法将目的基因（TaNHX2基因）导入原生质体，请写出主要操作流程：先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，然后用该农杆菌感染植物细胞先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，然后用该农杆菌感染植物细胞。
原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇，其作用是维持一定的渗透压，保持原生质体的形态维持一定的渗透压，保持原生质体的形态。
（4）为了从个体水平检测成果，需要进行的操作是转基因植株种植在盐碱地，观察其生长状况转基因植株种植在盐碱地，观察其生长状况。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】Sau3AI；目的基因在质粒上的连接方向不确定；EcoRI和BamHI；单位时间内单位体积中反应物的消耗量或产物的增加量；先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，然后用该农杆菌感染植物细胞；维持一定的渗透压，保持原生质体的形态；转基因植株种植在盐碱地，观察其生长状况
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：31引用：3难度：0.6
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
