干扰素在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白,几乎能抵御所有病毒引起的感染,传统生产方法成本高、产量低,获得的干扰素在体外不易保存。家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力,将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药.请回答相关问题:
(1)利用基因工程生产干扰素,过程是:
①从健康人体的外周静脉血分离能合成干扰素的 免疫免疫细胞,从中提取mRNA,经 逆转录逆转录法获取目的基因。
②用 限制限制酶处理载体和目的基因后,DNA连接酶处理,形成基因表达载体。为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自干扰素基因的片段正确插入表达载体的 启动子启动子和 终止子终止子之间。
③利用生物反应器培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以 增大细胞贴壁生长的附着面积增大细胞贴壁生长的附着面积,增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。
④在检验干扰素基因是否已经导入家蚕细胞时,需要用到PCR技术。该PCR反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、Taq酶Taq酶和 引物引物。
(2)利用蛋白质工程对干扰素进行改造,基本途径是:预期蛋白质 功能功能→设计预期蛋白质 结构结构→推测氨基酸 序列序列→找到对应的脱氧核苷酸序列(基因)。
(3)利用细胞工程生产干扰素,设计思路是:将相应免疫细胞和瘤细胞融合,筛选出 杂交瘤细胞杂交瘤细胞,经细胞培养可获得大量干扰素。
【考点】单克隆抗体及其应用.
【答案】免疫;逆转录;限制;启动子;终止子;增大细胞贴壁生长的附着面积;Taq酶;引物;功能;结构;序列;杂交瘤细胞
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:9引用:1难度:0.7
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