回答与基因工程和植物克隆有关的问题：
HIV感染已成为威胁人类健康及社会发展的主要问题之一，临床实验证实，HIV壳体蛋白病毒样颗粒能够刺激机体产生特异的体液和细胞免疫。植物表达系统属于真核细胞表达系统，利用植物生产重组蛋白具有很多优点，包括：降低携带动物性病原体的危险性，易于纯化，不需特殊的运输和储藏条件，植物培养基价格低廉降低生产成本等，因此被认为是一个比微生物或动物更理想的蛋白生产系统。科学家们将经过改造的融合基因转入枸杞细胞，建立利用转基因枸杞根系分泌表达特定HIV壳体蛋白的反应系统。
（1）通过长期研究后，科学家已经测定该融合基因的碱基序列，下面为利用PCR仪进行PCR的操作步骤请完善相关步骤内容。
a.按配方准备好各组分。
b.用微量移液器依次加入各组分。
c.进行离心离心，使反应液集中在微量离心管底部。
（2）若采用农杆菌转化法导入目的基因，需先将融合基因插入农杆菌Ti质粒的控制质粒DNA转移的基因控制质粒DNA转移的基因中，再通过农杆菌的侵染将重组DNA分子转入枸杞细胞中。此过程中影响转化效率的因素除了温度、培养时间等环境因素外还有农杆菌的种类、数量农杆菌的种类、数量、受体细胞的基因型受体细胞的基因型。（答出2点即可）将成功导入目的基因的枸杞细胞进行植物组织培养前需将其转入添加抗生素抗生素的培养基中培养，以除去附着的农杆菌。枸杞根系分泌表达HIV壳体蛋白的缺点是根系的生长较为缓慢，为了获得大量表达产物，可以对相应细胞进行液体悬浮培养液体悬浮培养。
（3）枸杞植株在多次继代培养后可能会丧失细胞全能性的表达能力，可能是由于细胞或组织中的激素平衡激素平衡被打破，或细胞对外源生长物质的敏感性外源生长物质的敏感性发生改变。
【考点】细胞工程的原理——细胞的全能性．
【答案】离心；控制质粒DNA转移的基因；农杆菌的种类、数量；受体细胞的基因型；抗生素；液体悬浮培养；激素平衡；外源生长物质的敏感性
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：27引用：1难度：0.7
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（2）可从固体培养基中筛选生长良好的愈伤组织，接种至含液体培养基的三角瓶中在摇床上振荡培养，细胞的生长速度和紫杉醇含量和培养的温度、pH、光照条件、培养基中的营养物质及细胞遗传特性有关外，还受的影响。在植物细胞不断再培养的过程中容易发生（可遗传变异类型）等变化，这会导致细胞全能性的丧失。
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（2）重组质粒中应有RNA聚合酶识别和结合的部位，该部位称为。
（3）由于细胞壁的存在，植物的组织培养和克隆有一定的难度，故常用（方法）将重组质粒导入烟草细胞的，再进行培养。待重新长出细胞壁，形成胚性细胞，此时，应该培养基中甘露醇的浓度，以利于胚性细胞继续培养形成细胞团，然后经两条途径形成转基因烟草植株。该转基因烟草植株在多次继代培养后，会（“保持”或“丧失”）细胞全能性的表达。
（4）若转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性，但抗性较低，可能原因是。发布：2024/6/27 10:35:59组卷：34引用：1难度：0.7 -
3．以下可以说明细胞全能性的实验是（ ）
发布：2024/12/31 1:30:1组卷：9引用：4难度：0.9
