研究发现，大豆GmNF-YA19基因在不同非生物胁迫中均有响应。为研究该基因的功能，科研人员利用PCR扩增GmNF-YA19基因，构建GmNF-YA19基因表达载体并转化烟草，实验过程如图1、2所示。回答下列问题：
（1）在利用PCR扩增GmNF-YA19基因时，需要设计 22种特异性引物，引物的作用是 使DNA聚合酶从引物的3‘端开始连接脱氧核苷酸使DNA聚合酶从引物的3‘端开始连接脱氧核苷酸。
（2）根据图中信息，最好选用 PvuⅡ和EcoRⅠPvuⅡ和EcoRⅠ两种限制酶切割含目的基因的DNA片段和载体，其原因是 保证目的基因和质粒正向连接，避免发生自身环化保证目的基因和质粒正向连接，避免发生自身环化（答出2项）。
（3）基因表达载体导入烟草常用 农杆菌转化农杆菌转化法。有研究表明，GmNF-YA19基因对干旱胁迫的应答最显著，科研人员对GmNF-YA19转基因烟草（OE1、OE2和OE3）的抗旱性进行鉴定。对干旱处理后的WT（野生型）烟草和GmNF-YA19转基因烟草叶片的电解质渗透率及丙二醛（二者反应叶片损伤程度）、可溶性糖和脯氨酸（二者是细胞中渗透压调节物质）含量进行检测，结果如图3所示。
由结果分析，GmNF-YA19基因调节的机理可能是干旱胁迫下，GmNF-YA19基因的表达产物促进了可溶性糖和脯氨酸的产生，同时抑制了丙二醛的产生GmNF-YA19基因的表达产物促进了可溶性糖和脯氨酸的产生，同时抑制了丙二醛的产生。
【考点】基因工程的操作过程综合；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】2；使DNA聚合酶从引物的3‘端开始连接脱氧核苷酸；PvuⅡ和EcoRⅠ；保证目的基因和质粒正向连接，避免发生自身环化；农杆菌转化；GmNF-YA19基因的表达产物促进了可溶性糖和脯氨酸的产生，同时抑制了丙二醛的产生
【解答】
【点评】
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发布：2024/12/31 0:0:1组卷：4引用：3难度：0.5
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
